Apakah ujian PCR? Mari kita bincangkannya secara ringkas!

Apabila kita mendengar perkataan PCR, kita pasti terfikir tentang pandemik Covid, bukan? Zaman di mana kita terpaksa memasukkan swab ke dalam hidung dan menunggu laporan datang... itu tidak akan dilupakan. Tetapi tahukah anda bahawa PCR bukan sahaja digunakan untuk mengesan Covid? Ini sebenarnya ujian yang sangat penting yang telah membuat satu kejayaan besar dalam sains perubatan. Jadi hari ini, mari kita bincangkan tentang apa itu ujian PCR ini, perkara lain yang boleh dikesannya, dan bagaimana ia berfungsi dengan cara yang mudah dan anda boleh fahami.

Apakah PCR secara ringkasnya?

Baiklah, mari kita jelaskan begini. Bayangkan anda perlu mencari satu perkataan pada satu halaman buku, daripada ribuan buku di perpustakaan yang besar. Betapa sukarnya itu? Ia seperti mencari sekeping kecil DNA atau RNA , bahan genetik di dalam sel-sel dalam badan kita.

Teknologi PCR (Polymerase Chain Reaction) memudahkan tugas yang sukar itu. Apa yang dilakukannya ialah menyalin cebisan DNA atau RNA terkecil yang kita cari beratus-ratus ribu, malah berjuta-juta kali (amplifikasi). Ia seperti mencari halaman dengan perkataan itu di dalam buku perpustakaan, memasukkannya ke dalam mesin fotokopi, dan membuat kira-kira sejuta salinan. Kemudian, memandangkan perkataan yang sukar dicari itu kini berada di mana-mana, kita boleh mengenal pastinya dengan mudah.

Secara ringkasnya, PCR ialah ujian yang mengambil sejumlah kecil sel daripada badan kita, setitik darah, atau swab hidung, dan secara buatan menumbuhkan sekeping DNA atau RNA tertentu di dalamnya di makmal untuk mengesahkan sama ada ia terdapat dalam sampel kita atau tidak. Ini adalah ujian yang sangat sensitif. Ini bermakna ia boleh mengesan walaupun sejumlah kecil virus. Kaedah ini tergolong dalam sekumpulan ujian yang dipanggil Ujian Penguatan Asid Nukleik (NAAT).

Apakah penyakit yang boleh dikesan melalui ujian PCR?

Walaupun PCR telah menjadi popular disebabkan oleh pandemik COVID, ia telah digunakan dalam dunia perubatan selama beberapa dekad. Terdapat banyak perkara yang boleh dikesan dengan ujian ini. Mari kita lihat beberapa perkara utama.

Bagaimanakah cara untuk mengambil sampel bagi ujian PCR?

Cara anda mengambil sampel untuk ujian PCR bergantung pada jenis penyakit yang anda cari. Kaedah pengambilan sampel adalah berbeza untuk setiap keadaan.

Kebanyakan masa, anda tidak perlu melakukan apa-apa yang istimewa untuk membuat persediaan bagi ujian PCR. Walau bagaimanapun, dalam beberapa kes, seperti semasa melakukan sesuatu seperti biopsi, doktor anda akan memberikan arahan yang diperlukan terlebih dahulu.

Bagaimanakah teknologi PCR berfungsi?

Baiklah, sekarang mari kita lihat bagaimana teknologi menakjubkan ini sebenarnya berfungsi. Ini agak saintifik, tetapi saya akan menerangkannya secara ringkas.

1. Penyediaan sampel: Pertama, DNA atau RNA diasingkan daripada sampel (darah, rembesan, dll.) yang diambil daripada anda.

2. Membuat campuran: Seterusnya, DNA/RNA yang diasingkan ini dicampurkan dengan beberapa bahan kimia khas. Bahan utama dalam campuran ini ialah enzim yang dipanggil DNA Polimerase . Ini adalah enzim utama yang melakukan kerja fotokopi.

3. Kitaran Pemanasan dan Penyejukan: Kini tiub kecil dengan campuran ini diletakkan di dalam mesin khas. Mesin ini menaikkan dan menurunkan suhu dengan sangat cepat.

• Denaturasi: Pertama, suhu dinaikkan kepada kira-kira 95 darjah Celsius. Ini menyebabkan dua untaian DNA terpisah.
• Penyepuhlindapan: Seterusnya, suhu diturunkan kepada kira-kira 55 darjah. Kemudian, kepingan kecil DNA (primer) yang sepadan dengan serpihan DNA yang kita cari dilekatkan pada untaian DNA yang dipisahkan.
• Pemanasan Semula (Sambungan): Kemudian suhu dinaikkan kepada kira-kira 72 darjah. Kemudian enzim DNA polimerase masuk dan membuat untaian DNA baharu daripada primer tersebut yang sepadan dengan untaian DNA asal.

4. Penyalinan: Kini dua salinan satu untaian DNA telah dibuat. Kitaran suhu ini berulang kira-kira 30-40 kali. Dalam satu kitaran, jumlah DNA berganda. Dua menjadi empat, empat menjadi lapan, lapan menjadi enam belas... Selepas kira-kira 30 kitaran, lebih daripada satu bilion salinan telah dibuat daripada sekeping DNA asal.

Kini, serpihan DNA/RNA itu, yang sebelum ini terlalu kecil untuk dikesan, telah menjadi cukup besar untuk dikesan dengan mudah.

Adakah terdapat jenis ujian PCR?

Ya, terdapat dua jenis utama yang perlu kita ketahui.

• PCR transkriptase songsang (RT-PCR): Sesetengah virus, seperti Covid, influenza dan HIV, mempunyai maklumat genetik mereka dalam RNA dan bukannya DNA. PCR biasa hanya boleh menyalin DNA. Jadi, apa yang anda lakukan dalam RT-PCR ialah terlebih dahulu menggunakan enzim khas (`Transkriptase Songsang`) untuk 'menukar' RNA tersebut kepada DNA. DNA yang terhasil dipanggil DNA pelengkap (cDNA). Kemudian proses PCR biasa berlaku.

• PCR Masa Nyata / PCR Kuantitatif (Q-PCR): Ini adalah kaedah yang sedikit lebih maju. Apa yang berlaku dalam kaedah ini ialah apabila DNA disalin, label pendarfluor dilekatkan padanya. Apabila jumlah DNA yang disalin meningkat, pendarfluor ini juga meningkat. Mesin boleh mengukur pendarfluor ini. Jadi, semasa kita menunggu, iaitu, dalam masa nyata , kita boleh melihat sama ada DNA yang berkaitan terdapat dalam sampel atau tidak. Bukan itu sahaja, ia juga boleh memberikan gambaran kasar tentang berapa banyak virus dalam sampel asal (beban virus). Ujian RT-PCR Masa Nyata yang menggabungkan kedua-dua kaedah ini sering digunakan untuk mengesan Covid.

Apakah maksud laporan PCR?

Adalah sangat penting untuk memahami laporan PCR apabila anda menerimanya.

• Dikesan / Positif: Jika laporan anda menyatakan "Dikesan" atau "Positif," ini bermakna sampel anda mengandungi bahagian virus atau bahan genetik yang mereka cari. Secara ringkasnya, anda mungkin dijangkiti.

• Tidak Dikesan / Negatif: Ini bermakna serpihan DNA/RNA yang berkaitan tidak dapat ditemui dalam sampel yang diuji. Ini bermakna anda kemungkinan besar tidak mempunyai jangkitan tersebut.

Tempoh masa yang diperlukan untuk mendapatkan keputusan berbeza-beza bergantung pada ujian yang dijalankan. Swab hidung (seperti COVID, influenza) biasanya mendapat keputusan dalam masa 24 jam. Walau bagaimanapun, ujian darah dan biopsi untuk mencari penyakit genetik boleh mengambil masa seminggu atau lebih.

Jika anda mempunyai sebarang soalan atau kebimbangan mengenai ujian PCR atau keputusannya, pastikan anda berbincang dengan doktor anda mengenainya.