Давайте узнаем о ПЦР-тесте простым языком, как от друга!

Возможно, вы помните, что во время пандемии COVID-19 мы все говорили о ПЦР-тесте . Некоторые, наверное, немного испугались, представив себе палочку, вставленную в нос? Но что же это такое на самом деле — ПЦР-тест? Может ли он только выявлять COVID-19? Нет, ПЦР — это очень важный метод диагностики в медицине, который помогает во многих областях. Давайте сегодня поговорим обо всем этом просто и понятно, как если бы мы разговаривали с хорошим другом.

Что такое ПЦР? Можете немного объяснить?

Проще говоря, ПЦР — это аббревиатура от полимеразной цепной реакции . Она используется для обнаружения генетического материала в нашем организме, будь то ДНК или РНК . Представьте себе небольшой образец, взятый у вас, это может быть капля крови или мазок из носа. Этот крошечный фрагмент ДНК или РНК из образца берется, и в лаборатории создаются миллионы, а может быть, и миллиарды копий. Это то, что ученые называют амплификацией , что означает «увеличение» или «умножение». Это как создание множества копий одного листа бумаги с помощью ксерокса.

Создание множества подобных копий облегчает ученым изучение ДНК или РНК в исходном небольшом образце и позволяет выявить любые его особенности. ПЦР относится к группе тестов, называемых тестами амплификации нуклеиновых кислот (NAAT) .

Хотя многие слышали слово ПЦР в связи с тестированием на COVID-19, эта технология давно используется в медицине и является очень полезным методом.

Что можно обнаружить с помощью ПЦР?

Теперь давайте посмотрим, что может выявить этот ПЦР-тест. Многие думают, что он предназначен только для COVID-19. Но это не так. Посмотрите:

• Инфекционные заболевания: ПЦР-тест может помочь определить, вызваны ли лихорадка, простуда или кашель вирусом , бактерией , грибком или паразитом . Например:
• Вирус SARS-CoV-2 , вызывающий COVID-19 (COVID-19) .
• Грипп — так мы обычно называем это заболевание.
• Респираторно-синцитиальный вирус (РСВ), особенно часто встречающийся у младенцев.
• Бактерии, вызывающие туберкулез.
• Множество других вирусных и бактериальных инфекций.
• Генетические заболевания: У некоторых людей есть генетические заболевания, которые передаются по наследству, верно? Например , муковисцидоз.Этот метод ПЦР также используется для диагностики таких заболеваний, как болезнь Хантингтона и синдром ломкой Х-хромосомы . Это очень сложные заболевания, поэтому ранняя диагностика крайне важна для лечения.
• Виды рака: Этот метод также помогает выявить определенные виды рака, такие как лимфома .
• Генетические изменения при раке: При лечении онкологических больных этот ПЦР-тест также может выявлять специфические вариации/мутации генов в раковых клетках. Это позволит использовать таргетную терапию, направленную на эти конкретные изменения. Это значительный шаг вперед в области лечения рака.
• Риск развития заболеваний в будущем: Люди с определенными генетическими изменениями могут подвергаться более высокому риску развития серьезных заболеваний, таких как рак, в будущем. Этот ПЦР-тест также используется для генетического тестирования на риск развития рака . Это позволяет заранее узнать о риске и при необходимости внести изменения в образ жизни, или же сохранять бдительность, регулярно проходя тестирование.
• Пренатальное тестирование: ПЦР-тесты также полезны для определения наличия у будущего ребенка беременной женщины генетического заболевания.

Более того, вы, возможно, видели это в фильмах, где ДНК-доказательства, такие как крошечный волосок или пятно крови, найденные на месте преступления, используются для идентификации преступника. Судебно-криминалистические лаборатории также используют эту технологию ПЦР для увеличения количества ДНК и проведения анализов.

Какие тесты и методы используют технологию ПЦР?

Технология ПЦР используется в различных методах тестирования. Тип теста, для которого вам потребуется взять образец, будет зависеть от того, что именно вы тестируете. Вот несколько примеров:

• Анализы крови: Берется образец крови, и с помощью ПЦР выявляются генетические изменения и некоторые инфекционные заболевания.
• Мазок из носоглотки: образец слизи, взятый из внутренней части носа или горла, может быть использован для тестирования на респираторные инфекции, такие как грипп, COVID-19 и РСВ. Все мы сталкивались с этим во время пандемии COVID-19.
• Преимплантационная генетическая диагностика (ПГД) или преимплантационный генетический скрининг (ПГС): В процессе экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) берут несколько клеток эмбрионов для проверки на наличие генетических заболеваний до их имплантации в матку матери. Обычно это делается через несколько дней после забора яйцеклеток.
• Амниоцентез:Во время беременности небольшое количество амниотической жидкости, окружающей плода в утробе матери, может быть использовано для определения генетического статуса ребенка методом ПЦР. Этот тест проводится врачом-специалистом.
• Биопсия: Для выявления генетических мутаций в раковых клетках (молекулярное тестирование) берется небольшой образец опухоли (биопсия опухоли) или биопсия костного мозга. Это похоже на небольшую хирургическую операцию. Затем образец используется для проведения ПЦР с целью выявления генетических изменений.

Как подготовиться к этому тесту?

В большинстве случаев для ПЦР-теста специальная подготовка не требуется. Однако это зависит от того, что именно вы проверяете и какой метод используется для сбора образца. Например, для некоторых анализов крови может потребоваться голодание в течение нескольких часов. Поэтому лучше всего уточнить у врача или в медицинском учреждении, нужно ли вам что-то особенное делать.

Как работает ПЦР? Немного науки!

Это немного научная история, но позвольте мне объяснить её в упрощенном виде. ПЦР (полимеразная цепная реакция) идентифицирует последовательность, уникальную для искомой ДНК, то есть специфичную для неё. Эта последовательность может представлять собой специфическое генетическое изменение при раке, или это может быть генетический код вируса или бактерии. Это называется целевой ДНК .

Название «полимеразная цепная реакция» относится к процессу, при котором в лабораторных условиях создается (амплифицируется) большое количество копий целевой ДНК. В этом процессе используется фермент, называемый ДНК-полимеразой . Этот фермент создает копии целевой ДНК, если она присутствует в образце.

Эта «цепная реакция» происходит, когда раствор проходит множество циклов нагревания и охлаждения. За один цикл количество ДНК может удвоиться. Представьте себе это как увеличение количества ДНК с одного до двух, с двух до четырех, с четырех до восьми... и так далее, в конечном итоге образуя миллионы копий. Преимущество этого метода заключается в том, что ПЦР может обнаруживать даже небольшие количества ДНК или РНК, которые в противном случае были бы пропущены другими тестами.

Часто после проведения ПЦР ученым приходится проводить дополнительные тесты для анализа амплифицированной ДНК. Но иногда в процессе ПЦР в раствор добавляют специальные метки, которые позволяют определить, является ли образец положительным или отрицательным. Этот метод можно использовать для быстрого получения результатов, особенно при поиске инфекций, таких как вирусы.

Какие существуют типы ПЦР?

Существуют разные типы ПЦР. Некоторые требуют дополнительных этапов для копирования или анализа ДНК. Рассмотрим два основных типа:

1. Обратная транскриптазная ПЦР (ОТ-ПЦР)

Представьте, что генетическая информация, которую мы хотим скопировать и найти, находится не в ДНК, а в РНК. (Например, вирус COVID-19 содержит РНК). Тогда в этом методе ОТ-ПЦР РНК сначала преобразуется в ДНК с помощью специального фермента (обратной транскриптазы). Образовавшаяся ДНК называется комплементарной ДНК (кДНК) . После этого проводится обычный процесс ПЦР, упомянутый ранее. Потому что обычная ПЦР может быть проведена только на ДНК.

2. ПЦР в реальном времени / Количественная ПЦР (К-ПЦР)

В процессе создания копий ДНК к ним добавляются специальные флуоресцентные метки . Эти метки излучают свет при связывании с целевой ДНК. Таким образом, без дополнительных анализов, специалисты, проводящие тест, могут в режиме реального времени определить наличие соответствующей ДНК в образце. Более того, они могут получить количественное представление о её количестве.

Затрудняет понимание то, что некоторые также называют это «RT-PCR». Но это не то же самое, что упомянутая ранее ПЦР с обратной транскриптазой. Кроме того, этот метод ПЦР в реальном времени может использоваться в сочетании с упомянутой ранее ПЦР с обратной транскриптазой. В этом случае он называется ПЦР в реальном времени (real-time RT-PCR) . Этот метод ПЦР в реальном времени используется для анализа мазков из носа с целью выявления РНК-вирусов, таких как COVID-19 и грипп.

Что показывают результаты ПЦР-теста?

Когда вы получите результаты ПЦР-теста, формулировка может немного отличаться в зависимости от того, что именно тестировалось.

• Как правило, если в результате теста указано «обнаружено» или «присутствует», это означает, что у вас есть генетическая мутация или инфекция, которую искал тест.
• Если результат указан как «не обнаружено», это означает, что тест не смог обнаружить целевую ДНК или РНК, которая тестировалась. Однако в случае инфекции это иногда может означать, что тестирование было проведено на слишком ранней стадии инфекционного процесса. Инфекция может быть еще присутствует, но вируса или бактерий может быть недостаточно для обнаружения методом ПЦР на данном этапе.

Как интерпретировать результаты ПЦР-тестов на COVID-19?

Многим это уже хорошо известно.

• Положительный результат ПЦР-теста на COVID -19 (то есть в вашем отчете указано «Обнаружено») означает, что вы , вероятно, инфицированы COVID-19 или недавно выздоровели от COVID-19 (иногда ПЦР-тест может оставаться положительным в течение некоторого времени после выздоровления).
• Если вы получили отрицательный результат ПЦР-теста на COVID («Не обнаружено»), это означает, что , скорее всего, у вас не было COVID-19 на момент взятия мазка из носа. Однако, как я уже упоминал ранее, иногда на ранних стадиях инфекции, особенно если у вас нет симптомов, ПЦР-тесты могут быть отрицательными. Поэтому, если у вас есть симптомы, ваш врач может посоветовать вам пройти повторное тестирование через несколько дней.

Сколько времени занимает получение результатов ПЦР?

Это также зависит от проводимого теста.

• Результаты анализов с помощью мазка из носа на распространенные вирусы, такие как грипп и COVID-19, обычно становятся известны через несколько часов или через сутки .
• Результаты генетических тестов, основанных на анализе крови и биопсии, могут быть готовы через неделю или даже больше, поскольку процесс анализа несколько сложнее.

Когда необходимо обратиться к врачу?

Если у вас возникли какие-либо вопросы или опасения по поводу ПЦР-теста или его результатов, обязательно поговорите со своим врачом. Он сможет вам все объяснить.

Самое важное, что нужно усвоить.

Хотя слова «ПЦР-тест» внезапно вошли в наш повседневный разговор с началом пандемии COVID-19 в 2020 году, на самом деле это очень ценная технология, которую врачи используют уже десятилетия. ПЦР помогает идентифицировать и копировать мельчайшие количества ДНК или РНК, что может быть использовано для диагностики различных заболеваний.

Хотя для врачей это обычная процедура, для вас она может быть нетипичной. Мы это понимаем. Но самое приятное то, что для этого требуется лишь небольшой образец вашего организма, и сама процедура обычно занимает всего несколько минут. Если у вас есть какие-либо вопросы, опасения или сомнения по этому поводу, пожалуйста, поговорите со своим врачом. Он все вам объяснит. Будьте здоровы!

ПЦР -тест, ДНК, РНК, генетическое тестирование, диагностика, COVID-19, вирус