आइए, पीसीआर टेस्ट के बारे में सरल तरीके से सीखें, बिल्कुल एक दोस्त की तरह!

आपको याद होगा कि कोविड-19 महामारी के दौरान हम सभी ने पीसीआर टेस्ट के बारे में बात की थी। नाक में सुई चुभोने के बारे में सोचकर कुछ लोग थोड़ा डर गए होंगे। लेकिन आखिर यह पीसीआर टेस्ट है क्या? क्या इससे सिर्फ कोविड-19 का ही पता चलता है? नहीं, पीसीआर चिकित्सा में एक बहुत ही महत्वपूर्ण परीक्षण विधि है जो कई चीजों में मददगार साबित होती है। आइए आज हम इस बारे में सरल और स्पष्ट तरीके से बात करें, जैसे किसी अच्छे दोस्त से बात कर रहे हों।

पीसीआर क्या है? क्या आप इसे थोड़ा समझा सकते हैं?

सरल शब्दों में कहें तो, पीसीआर पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन का संक्षिप्त रूप है। इसका उपयोग हमारे शरीर में मौजूद आनुवंशिक सामग्री , चाहे वह डीएनए हो या आरएनए , का पता लगाने के लिए किया जाता है। कल्पना कीजिए कि आपसे एक छोटा सा नमूना लिया जाता है, जैसे खून की एक बूंद या नाक के अंदर से लिया गया स्वैब। उस नमूने में मौजूद डीएनए या आरएनए के उस छोटे से टुकड़े को लिया जाता है और प्रयोगशाला में उसकी लाखों, शायद अरबों, प्रतियां बनाई जाती हैं। वैज्ञानिक इसे प्रवर्धन कहते हैं, जिसका अर्थ है "बढ़ाना" या "गुणा करना"। यह ठीक उसी तरह है जैसे फोटोकॉपी मशीन से कागज की एक शीट की कई प्रतियां बनाना।

इस तरह कई प्रतियां बनाकर वैज्ञानिकों के लिए मूल छोटे नमूने में मौजूद डीएनए या आरएनए का अध्ययन करना और उसमें मौजूद किसी विशेष तत्व का पता लगाना आसान हो जाता है। पीसीआर न्यूक्लिक एसिड एम्प्लीफिकेशन टेस्ट (एनएएटी) नामक परीक्षणों के समूह से संबंधित है।

हालांकि कई लोगों ने कोविड-19 परीक्षण के संबंध में पीसीआर शब्द सुना है, लेकिन इस तकनीक का उपयोग चिकित्सा क्षेत्र में लंबे समय से किया जा रहा है और यह एक बहुत ही उपयोगी विधि है।

पीसीआर द्वारा क्या-क्या पता लगाया जा सकता है?

अब देखते हैं कि यह पीसीआर टेस्ट किन-किन चीजों का पता लगा सकता है। कई लोगों को लगता है कि यह सिर्फ कोविड-19 के लिए है। लेकिन ऐसा नहीं है। देखिए:

• संक्रामक रोग: पीसीआर परीक्षण से यह निर्धारित करने में मदद मिल सकती है कि आपको जो बुखार, सर्दी या खांसी है, वह वायरस , बैक्टीरिया , कवक या परजीवी के कारण है या नहीं। उदाहरण के लिए:
• SARS-CoV-2 वायरस, जो COVID-19 का कारण बनता है।
• इन्फ्लुएंजा , हम आमतौर पर इसे फ्लू कहते हैं।
• रेस्पिरेटरी सिंसिटियल वायरस (आरएसवी), जो विशेष रूप से छोटे शिशुओं में आम है।
• तपेदिक पैदा करने वाले जीवाणु।
• कई अन्य वायरल और बैक्टीरियल संक्रमण।
• आनुवंशिक रोग: कुछ लोगों को आनुवंशिक रोग होते हैं जो विरासत में मिलते हैं, है ना? उदाहरण के लिए , सिस्टिक फाइब्रोसिस।इस पीसीआर का उपयोग हंटिंगटन रोग और फ्रजाइल एक्स सिंड्रोम जैसी स्थितियों के निदान के लिए भी किया जाता है। ये बहुत जटिल स्थितियां हैं, इसलिए उपचार के लिए शीघ्र निदान अत्यंत महत्वपूर्ण है।
• कैंसर के प्रकार: यह विधि कुछ प्रकार के कैंसर, जैसे कि लिम्फोमा , की पहचान करने में भी मदद करती है।
• कैंसर में जीन परिवर्तन: कैंसर से पीड़ित व्यक्ति के उपचार के दौरान, यह पीसीआर परीक्षण कैंसर कोशिकाओं में विशिष्ट जीन भिन्नताओं/उत्परिवर्तनों का पता लगा सकता है। इससे लक्षित चिकित्सा का उपयोग करके इन विशिष्ट परिवर्तनों को लक्षित किया जा सकेगा। यह कैंसर उपचार के क्षेत्र में एक महत्वपूर्ण प्रगति है।
• भविष्य में बीमारियों का खतरा: कुछ आनुवंशिक परिवर्तनों वाले लोगों को भविष्य में कैंसर जैसी गंभीर बीमारियों का खतरा अधिक हो सकता है। इस पीसीआर का उपयोग कैंसर के जोखिम का पता लगाने के लिए आनुवंशिक परीक्षण में भी किया जाता है। इससे आपको पहले से ही जानकारी मिल जाती है और जरूरत पड़ने पर आप अपनी जीवनशैली में बदलाव कर सकते हैं या नियमित रूप से परीक्षण करवाकर सतर्क रह सकते हैं।
• प्रसवपूर्व परीक्षण: पीसीआर उन परीक्षणों में भी सहायक होता है जो यह देखने के लिए किए जाते हैं कि क्या गर्भवती महिला के अजन्मे बच्चे में कोई आनुवंशिक स्थिति है।

इतना ही नहीं, आपने फिल्मों में भी देखा होगा कि अपराध स्थल से मिले डीएनए साक्ष्य, जैसे कि एक छोटा सा बाल या खून का धब्बा, का उपयोग अपराधी की पहचान करने के लिए किया जाता है। फोरेंसिक प्रयोगशालाएं भी डीएनए की मात्रा बढ़ाने और परीक्षण करने के लिए इस पीसीआर तकनीक का उपयोग करती हैं।

पीसीआर तकनीक का उपयोग करने वाले परीक्षण और विधियां क्या हैं?

पीसीआर तकनीक का उपयोग कई तरह की परीक्षण विधियों में किया जाता है। आपको किस प्रकार के परीक्षण के लिए नमूना देना होगा, यह इस बात पर निर्भर करेगा कि आप किस चीज का परीक्षण कर रहे हैं। यहाँ कुछ उदाहरण दिए गए हैं:

• रक्त परीक्षण: रक्त का नमूना लिया जाता है और पीसीआर का उपयोग करके आनुवंशिक परिवर्तनों और कुछ संक्रामक रोगों का पता लगाया जाता है।
• नासोफेरिंजियल स्वैब: नाक या गले के अंदर से लिया गया बलगम का नमूना इन्फ्लूएंजा (फ्लू), कोविड-19 और आरएसवी जैसे श्वसन संक्रमणों की जांच के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। कोविड के दौरान हम सभी ने इसका अनुभव किया है।
• प्रीइम्प्लांटेशन जेनेटिक डायग्नोसिस (पीजीडी) या प्रीइम्प्लांटेशन जेनेटिक स्क्रीनिंग (पीजीएस): इन विट्रो फर्टिलाइजेशन (आईवीएफ) प्रक्रिया के दौरान, भ्रूण से कुछ कोशिकाएं लेकर मां के गर्भाशय में प्रत्यारोपित करने से पहले उनकी आनुवंशिक स्थितियों की जांच की जाती है। यह आमतौर पर अंडाणु निकालने के कुछ दिनों बाद किया जाता है।
• एमनियोसेंटेसिस:गर्भावस्था के दौरान, मां के गर्भ में शिशु के चारों ओर मौजूद थोड़ी मात्रा में एमनियोटिक द्रव का उपयोग करके पीसीआर विधि से शिशु की आनुवंशिक स्थिति का परीक्षण किया जा सकता है। यह परीक्षण एक विशेषज्ञ डॉक्टर द्वारा किया जाता है।
• बायोप्सी: कैंसर कोशिकाओं में आनुवंशिक उत्परिवर्तन (आणविक परीक्षण) की पहचान करने के लिए, ट्यूमर का एक छोटा सा नमूना (ट्यूमर बायोप्सी) या अस्थि मज्जा बायोप्सी लिया जाता है। यह एक छोटी सर्जरी की तरह होता है। फिर इस नमूने का उपयोग पीसीआर परीक्षण के लिए किया जाता है ताकि आनुवंशिक परिवर्तनों का पता लगाया जा सके।

आप इस परीक्षा की तैयारी कैसे करते हैं?

अधिकांश मामलों में, पीसीआर परीक्षण के लिए किसी विशेष तैयारी की आवश्यकता नहीं होती है। हालांकि, यह इस बात पर निर्भर करता है कि आप किस चीज का परीक्षण करवा रहे हैं और नमूना एकत्र करने के लिए किस विधि का उपयोग किया जाता है। उदाहरण के लिए, कुछ रक्त परीक्षणों के लिए आपको परीक्षण से पहले कुछ घंटों तक उपवास करना पड़ सकता है। इसलिए, बेहतर होगा कि आप अपने डॉक्टर या परीक्षण केंद्र से पूछ लें कि क्या आपको कोई विशेष तैयारी करनी है।

पीसीआर कैसे काम करता है? थोड़ी सी विज्ञान की बात!

यह थोड़ा वैज्ञानिक विषय है, लेकिन मैं इसे सरल शब्दों में समझाता हूँ। पीसीआर का काम डीएनए में मौजूद उस विशिष्ट अनुक्रम की पहचान करना है, जो उस डीएनए के लिए अद्वितीय होता है। यह अनुक्रम कैंसर में होने वाला कोई विशिष्ट आनुवंशिक परिवर्तन हो सकता है, या किसी वायरस या बैक्टीरिया का आनुवंशिक कोड हो सकता है। इसे लक्षित डीएनए कहते हैं।

"पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन" नाम उस प्रक्रिया को संदर्भित करता है जिसके द्वारा प्रयोगशाला में लक्षित डीएनए की बड़ी संख्या में प्रतियां बनाई (प्रवर्धित) जाती हैं। इस प्रक्रिया में डीएनए पॉलीमरेज़ नामक एंजाइम का उपयोग होता है। यह एंजाइम नमूने में मौजूद लक्षित डीएनए की प्रतियां बनाता है।

यह "श्रृंखला अभिक्रिया" तब होती है जब कोई विलयन कई बार गर्म और ठंडा होने की प्रक्रिया से गुजरता है। एक चक्र में डीएनए की मात्रा दोगुनी हो सकती है। इसे ऐसे समझें: एक से दो, दो से चार, चार से आठ... और इसी तरह, अंततः लाखों प्रतियां बन जाती हैं। इसका लाभ यह है कि पीसीआर डीएनए या आरएनए की उन छोटी मात्राओं का भी पता लगा सकता है जिन्हें अन्य परीक्षणों से पता नहीं लगाया जा सकता।

अक्सर, पीसीआर परीक्षण के बाद, वैज्ञानिकों को प्रवर्धित डीएनए का विश्लेषण करने के लिए और भी परीक्षण करने पड़ते हैं। लेकिन कभी-कभी, पीसीआर प्रक्रिया के दौरान घोल में विशेष लेबल मिला दिए जाते हैं, जिससे पता चल जाता है कि नमूना पॉजिटिव है या नेगेटिव। इस विधि से जल्दी परिणाम प्राप्त किए जा सकते हैं, खासकर वायरस जैसे संक्रमणों की जांच करते समय।

पीसीआर कितने प्रकार के होते हैं?

पीसीआर कई प्रकार के होते हैं। कुछ में डीएनए की प्रतिलिपि बनाने या उसका विश्लेषण करने के लिए अतिरिक्त चरणों की आवश्यकता होती है। आइए दो मुख्य प्रकारों पर नज़र डालें:

1. रिवर्स-ट्रांसक्रिप्टेज़ पीसीआर (आरटी-पीसीआर)

मान लीजिए कि जिस आनुवंशिक जानकारी को हम कॉपी करना और खोजना चाहते हैं, वह DNA में नहीं, बल्कि RNA में है। (उदाहरण के लिए, कोविड-19 वायरस में RNA होता है)। तो, इस RT-PCR में, पहले RNA को एक विशेष एंजाइम (रिवर्स ट्रांसक्रिप्टेज़) का उपयोग करके DNA में परिवर्तित किया जाता है। इस प्रकार बने DNA को पूरक DNA (cDNA) कहा जाता है। इसके बाद, पहले बताई गई सामान्य PCR प्रक्रिया की जाती है। क्योंकि, सामान्य PCR केवल DNA पर ही की जा सकती है।

2. रियल-टाइम पीसीआर / क्वांटिटेटिव पीसीआर (क्यू-पीसीआर)

इस प्रक्रिया में डीएनए की प्रतियां बनाते समय, विशेष फ्लोरोसेंट लेबल मिलाए जाते हैं। ये लेबल लक्षित डीएनए से जुड़ने पर प्रकाश उत्सर्जित करते हैं। फिर, अतिरिक्त परीक्षण की आवश्यकता के बिना, परीक्षण करने वाले व्यक्ति वास्तविक समय में देख सकते हैं कि नमूने में संबंधित डीएनए मौजूद है या नहीं। इतना ही नहीं, वे इसकी मात्रा का मात्रात्मक अनुमान भी लगा सकते हैं।

भ्रम की बात यह है कि कुछ लोग इसे "आरटी-पीसीआर" भी कहते हैं। लेकिन यह पहले बताए गए रिवर्स-ट्रांसक्रिप्टेज़ पीसीआर से अलग है। साथ ही, इस रियल-टाइम पीसीआर विधि का उपयोग पहले बताए गए रिवर्स-ट्रांसक्रिप्टेज़ पीसीआर के साथ मिलाकर भी किया जा सकता है। तब इसे रियल-टाइम आरटी-पीसीआर (रियल-टाइम आरटी-पीसीआर) कहा जाता है। इस रियल-टाइम आरटी-पीसीआर विधि का उपयोग नाक के स्वैब परीक्षण में कोविड-19 और इन्फ्लूएंजा जैसे आरएनए वायरस का पता लगाने के लिए किया जाता है।

पीसीआर परीक्षण के परिणाम हमें क्या बताते हैं?

जब आपको पीसीआर टेस्ट के परिणाम मिलते हैं, तो परीक्षण के प्रकार के आधार पर शब्दों में थोड़ा अंतर हो सकता है।

• सामान्य तौर पर, यदि आपके परिणाम में "पता चला" या "मौजूद" लिखा है, तो इसका मतलब है कि आपमें वह आनुवंशिक उत्परिवर्तन या संक्रमण है जिसकी जांच परीक्षण में की गई थी।
• यदि परिणाम में "पता नहीं चला" लिखा आता है, तो इसका मतलब है कि परीक्षण लक्षित डीएनए या आरएनए का पता लगाने में असमर्थ रहा। हालांकि, संक्रमण के मामले में, इसका कभी-कभी यह अर्थ हो सकता है कि आपने संक्रमण की शुरुआती अवस्था में ही परीक्षण कर लिया था। आपको अभी भी संक्रमण हो सकता है, लेकिन उस समय पीसीआर द्वारा पता लगाने के लिए वायरस या बैक्टीरिया की पर्याप्त मात्रा मौजूद नहीं हो सकती है।

कोविड-19 पीसीआर परिणामों की व्याख्या कैसे करें?

यह ऐसी चीज है जिससे अब बहुत से लोग परिचित हैं।

• कोविड पीसीआर का सकारात्मक परिणाम - यानी आपकी रिपोर्ट में "पता चला" लिखा होना - यह दर्शाता है कि आप संभवतः कोविड-19 से संक्रमित हैं , या आप हाल ही में कोविड-19 से ठीक हुए हैं (कभी-कभी ठीक होने के बाद भी पीसीआर कुछ समय तक सकारात्मक रह सकता है)।
• अगर आपकी कोविड पीसीआर जांच का नतीजा नेगेटिव ("पता नहीं चला") आता है, तो इसका मतलब है कि जब आपने नाक से स्वैब लिया था, तब आपको कोविड-19 होने की संभावना बहुत कम है । हालांकि, जैसा कि मैंने पहले बताया, कभी-कभी, संक्रमण की शुरुआत में, खासकर अगर आपमें कोई लक्षण नहीं हैं, तो पीसीआर जांच नेगेटिव आ सकती है। इसलिए, अगर आपमें लक्षण हैं, तो आपका डॉक्टर आपको कुछ दिनों बाद दोबारा जांच करवाने की सलाह दे सकता है।

पीसीआर के नतीजे आने में कितना समय लगता है?

यह परीक्षण के प्रकार के आधार पर भी भिन्न होता है।

• इन्फ्लूएंजा और कोविड-19 जैसे सामान्य वायरस के लिए नाक से लिए जाने वाले स्वैब टेस्ट के परिणाम आने में आमतौर पर कुछ घंटे या एक दिन का समय लगता है।
• रक्त परीक्षण और बायोप्सी विधियों का उपयोग करने वाले आनुवंशिक परीक्षणों के परिणाम आने में एक सप्ताह या उससे अधिक समय लग सकता है क्योंकि विश्लेषण प्रक्रिया थोड़ी अधिक जटिल होती है।

आपको डॉक्टर से कब मिलने की जरूरत होती है?

यदि आपको पीसीआर परीक्षण या उसके परिणामों के बारे में कोई प्रश्न या चिंता है, तो अपने डॉक्टर से अवश्य बात करें। वे आपको सब कुछ समझा सकते हैं।

घर ले जाने के लिए सबसे महत्वपूर्ण संदेश

हालांकि 2020 के कोविड-19 महामारी के साथ "पीसीआर परीक्षण" शब्द अचानक हमारी दैनिक बातचीत में शामिल हो गया, लेकिन वास्तव में यह एक बहुत ही उपयोगी तकनीक है जिसका उपयोग डॉक्टर दशकों से कर रहे हैं। पीसीआर डीएनए या आरएनए की सूक्ष्म मात्रा को पहचानने और उसकी प्रतिलिपि बनाने में मदद करता है, जिसका उपयोग विभिन्न स्वास्थ्य स्थितियों के निदान के लिए किया जा सकता है।

डॉक्टरों के लिए यह आम बात है, लेकिन आपके लिए यह टेस्ट करवाना शायद आम बात न हो। हम समझते हैं। लेकिन अच्छी बात यह है कि इसके लिए आपके शरीर का केवल एक छोटा सा नमूना चाहिए होता है, और प्रक्रिया में आमतौर पर कुछ ही मिनट लगते हैं। यदि आपके मन में इस बारे में कोई सवाल, चिंता या शंका है, तो कृपया अपने डॉक्टर से बात करें। वे आपको सब कुछ समझा देंगे। स्वस्थ रहें!

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