Apa itu tes PCR? Mari kita bahas secara sederhana!

Saat mendengar kata PCR, kita langsung teringat pandemi Covid, bukan? Masa ketika kita harus memasukkan kapas ke hidung dan menunggu hasilnya... itu tak akan pernah terlupakan. Tapi tahukah Anda bahwa PCR tidak hanya digunakan untuk mendeteksi Covid? Ini sebenarnya adalah tes yang sangat penting yang telah membuat terobosan besar dalam ilmu kedokteran. Jadi hari ini, mari kita bahas apa itu tes PCR, apa saja yang dapat dideteksinya, dan bagaimana cara kerjanya dengan cara sederhana yang mudah dipahami.

Apa sebenarnya PCR itu?

Baiklah, mari kita jelaskan seperti ini. Bayangkan Anda harus menemukan satu kata di satu halaman dari satu buku, di antara ribuan buku di perpustakaan besar. Seberapa sulitkah itu? Itu seperti menemukan sepotong kecil DNA atau RNA , materi genetik di dalam sel-sel tubuh kita.

Teknologi PCR (Polymerase Chain Reaction) mempermudah tugas yang sulit itu. Teknologi ini menyalin bagian terkecil dari DNA atau RNA yang kita cari ratusan ribu, bahkan jutaan kali (amplifikasi). Ini seperti menemukan halaman yang berisi kata tertentu di buku perpustakaan, memasukkannya ke mesin fotokopi, dan membuat sekitar satu juta salinan. Kemudian, karena kata yang sulit ditemukan itu sekarang ada di mana-mana, kita dapat dengan mudah mengidentifikasinya.

Sederhananya, PCR adalah tes yang mengambil sejumlah kecil sel dari tubuh kita, setetes darah, atau usap hidung, dan secara artifisial menumbuhkan sepotong DNA atau RNA spesifik di dalamnya di laboratorium untuk memastikan apakah virus tersebut ada dalam sampel kita atau tidak. Ini adalah tes yang sangat sensitif. Artinya, tes ini dapat mendeteksi bahkan jumlah virus yang sangat kecil. Metode ini termasuk dalam kelompok tes yang disebut Tes Amplifikasi Asam Nukleat (NAAT).

Penyakit apa saja yang dapat dideteksi dengan tes PCR?

Meskipun PCR menjadi populer karena pandemi COVID, tes ini telah digunakan di dunia medis selama beberapa dekade. Ada banyak hal yang dapat dideteksi dengan tes ini. Mari kita lihat beberapa yang utama.

Bagaimana cara mengambil sampel untuk tes PCR?

Cara pengambilan sampel untuk tes PCR bergantung pada jenis penyakit yang ingin Anda deteksi. Metode pengambilan sampel berbeda untuk setiap kondisi.

Pada umumnya, Anda tidak perlu melakukan persiapan khusus untuk tes PCR. Namun, dalam beberapa kasus, seperti saat melakukan biopsi, dokter Anda akan memberikan instruksi yang diperlukan sebelumnya.

Bagaimana cara kerja teknologi PCR?

Oke, sekarang mari kita lihat bagaimana teknologi menakjubkan ini sebenarnya bekerja. Ini agak ilmiah, tetapi saya akan menjelaskannya secara sederhana.

1. Persiapan sampel: Pertama, DNA atau RNA diisolasi dari sampel (darah, sekresi, dll.) yang diambil dari Anda.

2. Membuat campuran: Selanjutnya, DNA/RNA yang telah diisolasi ini dicampur dengan beberapa bahan kimia khusus. Komponen utama dalam campuran ini adalah enzim yang disebut DNA Polimerase . Enzim inilah yang berperan penting dalam proses fotokopi.

3. Siklus Pemanasan dan Pendinginan: Sekarang tabung kecil berisi campuran ini ditempatkan di dalam mesin khusus. Mesin ini menaikkan dan menurunkan suhu dengan sangat cepat.

• Denaturasi: Pertama, suhu dinaikkan hingga sekitar 95 derajat Celcius. Hal ini menyebabkan kedua untai DNA terpisah.
• Annealing: Selanjutnya, suhu diturunkan hingga sekitar 55 derajat. Kemudian, potongan-potongan kecil DNA (primer) yang sesuai dengan fragmen DNA yang kita cari dilekatkan pada untai DNA yang telah dipisahkan.
• Pemanasan Ulang (Ekstensi): Kemudian suhu dinaikkan hingga sekitar 72 derajat. Lalu enzim DNA polimerase masuk dan membuat untai DNA baru dari primer yang cocok dengan untai DNA asli.

4. Penyalinan: Sekarang dua salinan dari satu untai DNA telah dibuat. Siklus suhu ini berulang sekitar 30-40 kali. Dalam satu siklus, jumlah DNA berlipat ganda. Dua menjadi empat, empat menjadi delapan, delapan menjadi enam belas... Setelah sekitar 30 siklus, lebih dari satu miliar salinan telah dibuat dari satu untai DNA asli.

Sekarang, fragmen DNA/RNA tersebut, yang sebelumnya terlalu kecil untuk dideteksi, telah menjadi cukup besar untuk dapat dideteksi dengan mudah.

Apakah ada beberapa jenis tes PCR?

Ya, pada dasarnya ada dua jenis yang perlu kita waspadai.

• PCR transkripsi balik (RT-PCR): Beberapa virus, seperti Covid, influenza, dan HIV, memiliki informasi genetik dalam RNA, bukan DNA. PCR normal hanya dapat menyalin DNA. Jadi, yang Anda lakukan dalam RT-PCR adalah pertama-tama menggunakan enzim khusus (`Transkriptase Balik`) untuk 'mengubah' RNA tersebut menjadi DNA. DNA yang dihasilkan disebut DNA komplementer (cDNA). Kemudian proses PCR normal berlangsung.

• PCR waktu nyata / PCR kuantitatif (Q-PCR): Ini adalah metode yang sedikit lebih canggih. Yang terjadi adalah, saat DNA disalin, label fluoresen ditempelkan padanya. Seiring bertambahnya jumlah DNA yang disalin, fluoresensi ini juga meningkat. Mesin dapat mengukur fluoresensi ini. Jadi, sambil menunggu, yaitu secara waktu nyata , kita dapat melihat apakah DNA yang relevan ada dalam sampel atau tidak. Tidak hanya itu, metode ini juga dapat memberikan gambaran kasar tentang seberapa banyak virus yang ada dalam sampel asli (beban virus). Tes RT-PCR waktu nyata yang menggabungkan kedua metode ini sering digunakan untuk mendeteksi Covid.

Apa arti laporan PCR?

Sangat penting untuk memahami laporan PCR saat Anda menerimanya.

• Terdeteksi / Positif: Jika laporan Anda bertuliskan "Terdeteksi" atau "Positif," itu berarti sampel Anda mengandung bagian dari virus atau materi genetik yang mereka cari. Sederhananya, Anda mungkin terinfeksi.

• Tidak Terdeteksi / Negatif: Ini berarti fragmen DNA/RNA yang relevan tidak dapat ditemukan dalam sampel yang diuji. Ini berarti Anda kemungkinan besar tidak memiliki infeksi tersebut.

Lamanya waktu menunggu hasil bervariasi tergantung pada jenis tes yang dilakukan. Tes usap hidung (seperti COVID, influenza) biasanya memberikan hasil dalam waktu 24 jam. Namun, tes darah dan biopsi untuk mendeteksi penyakit genetik dapat memakan waktu seminggu atau lebih.

Jika Anda memiliki pertanyaan atau kekhawatiran tentang tes PCR atau hasilnya, pastikan untuk membicarakannya dengan dokter Anda.