Хајде да сазнамо о ПЦР тесту једноставно, баш као од пријатеља!

Можда се сећате да смо током пандемије Ковид-19 сви причали о ПЦР тесту . Неки људи су сигурно били мало уплашени, помишљајући на штапић уметнут у нос? Али шта је тачно овај ПЦР тест? Да ли може да детектује само Ковид-19? Не, ПЦР је веома важна метода тестирања у медицини која помаже код многих ствари. Хајде да данас разговарамо о свему овоме, једноставно и јасно, као да разговарамо са добрим пријатељем.

Шта је ПЦР? Можете ли то мало објаснити?

Једноставно речено, ПЦР је скраћеница за полимеразну ланчану реакцију . Користи се за откривање генетског материјала у нашем телу, било ДНК или РНК . Замислите мали узорак узет од вас, то може бити кап крви или брис из унутрашњости вашег носа. Тај сићушни део ДНК или РНК у том узорку се узима и милиони, можда милијарде, копија се праве у лабораторији. То је оно што научници називају амплификацијом , што значи „повећање“ или „умножавање“. То је као прављење много копија једног листа папира помоћу фотокопир апарата.

Прављењем много оваквих копија, научницима је лакше да проучавају ДНК или РНК у оригиналном малом узорку и виде да ли у њему постоји нешто посебно. ПЦР припада групи тестова који се називају тестови амплификације нуклеинских киселина (NAAT) .

Иако су многи људи чули реч ПЦР у вези са тестирањем на Ковид-19, ова технологија се већ дуго користи у медицини и веома је корисна метода.

Шта се може открити ПЦР-ом?

Сада да видимо шта све овај ПЦР тест може да открије. Многи људи мисле да је то само за Ковид-19. Али то није случај. Погледајте:

• Заразне болести: ПЦР може помоћи да се утврди да ли је грозница, прехлада или кашаљ који имате узрокован вирусом , бактеријом , гљивицом или паразитом . На пример:
• Вирус SARS-CoV-2 који изазива COVID-19 (COVID-19) .
• Грип , то је оно што обично називамо грипом.
• Респираторни синцицијални вирус (РСВ), који је посебно чест код малих беба.
• Бактерије које изазивају туберкулозу.
• Многе друге вирусне и бактеријске инфекције.
• Генетске болести: Неки људи имају генетске болести које су наслеђене, зар не? Болести попут те, на пример , цистична фиброза.Ова ПЦР се такође користи за дијагностиковање стања попут Хантингтонове болести и синдрома фрагилног X хромозома . То су веома сложена стања, тако да је рано откривање веома важно за лечење.
• Врсте рака: Ова метода такође помаже у идентификацији одређених врста рака, као што је лимфом .
• Генске промене код рака: Приликом лечења особе оболеле од рака, овај PCR тест такође може да детектује специфичне генске варијације/мутације у тим ћелијама рака. Ово ће омогућити употребу циљане терапије за циљање тих специфичних промена. Ово је велики напредак у области лечења рака.
• Ризик од будућих болести: Људи са одређеним генетским променама могу бити изложени већем ризику од развоја озбиљних болести попут рака у будућности. Ова ПЦР се такође користи за генетско тестирање ризика од рака . Ово вам омогућава да будете унапред свесни и да направите промене начина живота ако је потребно, или да останете опрезни редовним тестирањем.
• Пренатално тестирање: ПЦР је такође користан у тестовима који се спроводе да би се утврдило да ли нерођено дете труднице има генетско обољење.

Не само то, можда сте то видели у филмовима, где се ДНК докази, попут ситне длаке или мрље крви пронађене на месту злочина, узимају и користе за идентификацију криминалца. Форензичке лабораторије такође користе ову ПЦР технологију да би повећале количину ДНК и спровеле тестове.

Који су тестови и методе које користе PCR технологију?

ПЦР технологија се користи у разним методама тестирања. Врста теста за који треба да узмете узорак зависиће од тога шта тестирате. Ево неколико примера:

• Крвне анализе: Узима се узорак крви и ПЦР се користи за откривање генетских промена и одређених заразних болести.
• Брис назофаринкса: Узорак слузи узет из унутрашњости носа или грла може се користити за тестирање респираторних инфекција попут грипа, COVID-19 и РСВ-а. То је оно што смо сви искусили током COVID-а.
• Преимплантациона генетска дијагноза (ПГД) или преимплантациони генетски скрининг (ПГС): Током процеса вантелесне оплодње (ИВФ) , узима се неколико ћелија из ембриона и тестира се на генетска обољења пре него што се имплантирају у мајчину материцу. Ово се обично ради неколико дана након вађења јајних ћелија.
• Амниоцентеза:Током трудноће, мала количина амнионске течности која окружује бебу у мајчиној материци може се користити за тестирање генетског статуса бебе помоћу ПЦР-а. Ово је тест који спроводи лекар специјалиста.
• Биопсија: Да би се идентификовале генетске мутације у ћелијама рака (молекуларно тестирање), узима се мали узорак тумора (биопсија тумора) или биопсија коштане сржи. Ово је као мала операција. Узорак се затим користи за извођење ПЦР-а како би се тражиле генетске промене.

Како се припремате за овај тест?

У већини случајева, није потребна посебна припрема за ПЦР тест. Међутим, то зависи од тога шта тестирате и која се метода користи за прикупљање узорка. На пример, неки тестови крви могу захтевати да постите неколико сати пре. Зато је најбоље да питате свог лекара или центар за тестирање да ли постоји нешто посебно што треба да урадите.

Како функционише ПЦР? Мало науке!

Ово је помало научна прича, али дозволите ми да је једноставно објасним. ПЦР ради да идентификује секвенцу која је јединствена за ДНК коју желите да тражите, односно специфична за њу. Ова секвенца може бити специфична генетска промена код рака или може бити генетски код вируса или бактерије. Ово се назива циљна ДНК .

Назив „ланчана реакција полимеразе“ односи се на процес којим се у лабораторији прави (амплификује) велики број копија циљне ДНК. Овај процес користи ензим који се зове ДНК полимераза . Овај ензим прави копије циљне ДНК, ако је она присутна у узорку.

Ова „ланчана реакција“ се дешава када раствор пролази кроз много циклуса загревања и хлађења. У једном циклусу, количина ДНК се може удвостручити. Замислите то као један до два, два до четири, четири до осам... и тако даље, на крају стварајући милионе копија. Предност овога је што ПЦР може да детектује чак и мале количине ДНК или РНК које би иначе биле пропуштене другим тестовима.

Често, након што се заврши ПЦР, научници морају да ураде још тестова како би анализирали амплификовану ДНК. Али понекад се током ПЦР процеса раствору додају посебне ознаке, које могу да укажу на то да ли је узорак позитиван или негативан. Ова метода се може користити за брзо добијање резултата, посебно када се траже инфекције попут вируса.

Које врсте ПЦР-а постоје?

Постоје различите врсте PCR-а. Неке захтевају додатне кораке за копирање или анализу ДНК. Погледајмо две главне врсте:

1. ПЦР са реверзном транскриптазом (РТ-ПЦР)

Замислите да генетска информација коју желимо да копирамо и тражимо није у ДНК, већ у РНК. (На пример, вирус Ковид-19 има РНК). Затим, у овој RT-PCR , оно што се ради јесте да се РНК (РНК) прво претвара у ДНК помоћу посебног ензима (реверзна транскриптаза). ДНК која се формира назива се комплементарна ДНК (цДНК) . Након тога се изводи нормалан PCR процес који је раније поменут. Јер, нормална PCR се може урадити само на ДНК.

2. ПЦР у реалном времену / Квантитативна ПЦР (Q-ПЦР)

Оно што се дешава јесте да се, како се праве копије ДНК, додају посебне флуоресцентне ознаке . Ове ознаке емитују светлост када се вежу за циљну ДНК. Затим, без додатног тестирања, они који раде тест могу у реалном времену да виде да ли је релевантна ДНК присутна у узорку. Не само то, већ могу добити и квантитативну представу о томе колико је присутно.

Збуњујуће је то што неки људи ово називају и „RT-PCR“. Али то није исто што и PCR са реверзном транскриптазом која је раније поменута. Такође, ова метода PCR у реалном времену може се користити у комбинацији са PCR са реверзном транскриптазом која је раније поменута. Тада се назива RT-PCR у реалном времену (real-time RT-PCR) . Ова метода RT-PCR у реалном времену се користи за тестове бриса из носа ради откривања РНК вируса попут Ковида-19 и грипа.

Шта нам говоре резултати ПЦР теста?

Када добијете резултате ПЦР теста, формулација може бити мало другачија, у зависности од тога на шта сте тестирани.

• Генерално, ако ваш резултат каже „детектовано“ или „присутно“, то значи да имате генетску мутацију или инфекцију коју је тест тражио.
• Ако резултат каже „није детектовано“, то значи да тест није могао да пронађе циљну ДНК или РНК која је тестирана. Међутим, у случају инфекције, то понекад може значити да сте тестирали прерано у процесу инфекције. Можда и даље имате инфекцију, али можда у том тренутку нема довољно вируса или бактерија да би се детектовали PCR-ом.

Како тумачити резултате ПЦР теста на Ковид-19?

Ово је нешто са чиме су многи људи сада упознати.

• Позитиван резултат ПЦР теста на COVID-19 - што значи да у вашем извештају пише „Откривено“ - значи да сте вероватно заражени вирусом COVID-19 или да сте се недавно опоравили од COVID-19 (понекад ПЦР може остати позитиван неко време након опоравка).
• Ако добијете негативан („Није детектовано“) COVID PCR резултат, то значи да највероватније нисте имали COVID-19 када сте узели брис из носа. Међутим, као што сам раније поменуо, понекад, у раној фази инфекције, посебно ако сте асимптоматски, PCR тестови могу бити негативни. Дакле, ако имате симптоме, ваш лекар вам може саветовати да се поново тестирате за неколико дана.

Колико је времена потребно да се добију резултати ПЦР-а?

Ово такође варира у зависности од теста који се изводи.

• Тестови бриса носа за уобичајене вирусе попут грипа и COVID-19 обично трају неколико сати или дан да би се добили резултати.
• Генетски тестови који користе анализе крви и методе биопсије могу трајати недељу дана или дуже да би се добили резултати јер је процес анализе мало сложенији.

Када треба да посетите лекара?

Ако имате било каквих питања или недоумица у вези са ПЦР тестом или његовим резултатима, обавезно разговарајте са својим лекаром. Он вам може све објаснити.

Најважнија порука коју треба понети кући

Иако су речи „PCR тест“ изненада ушле у наш свакодневни разговор током пандемије COVID-19 из 2020. године, то је заправо веома вредна технологија коју лекари користе деценијама. PCR помаже у идентификацији и копирању малих количина ДНК или РНК, што се може користити за дијагностиковање разних здравствених стања.

Иако је ово уобичајено за лекаре, можда није уобичајено да ви урадите тест. Разумемо то. Али најбоље је што је потребан само мали узорак вашег тела, а поступак обично траје само неколико минута. Ако имате било каквих питања, недоумица или сумњи у вези са овим, обратите се свом лекару. Он ће вам све објаснити. Останите здрави!

ПЦР тест, ДНК, РНК, генетско тестирање, дијагноза, Ковид-19, вирус