Давайце даведаемся пра ПЛР-тэст проста, як ад сябра!

Магчыма, вы памятаеце, што падчас пандэміі Covid-19 мы ўсе казалі пра ПЛР-тэст . Некаторыя людзі, напэўна, крыху спалохаліся, думаючы пра палачку, якую ўстаўляюць у нос. Але што ж такое гэты ПЛР-тэст? Ці можа ён выявіць толькі Covid-19? Не, ПЛР — гэта вельмі важны метад тэсціравання ў медыцыне, які дапамагае ў многіх рэчах. Давайце пагаворым пра ўсё гэта сёння проста і зразумела, як быццам мы размаўляем з добрым сябрам.

Што такое ПЦР? Ці можаце вы коратка растлумачыць?

Проста кажучы, ПЦР — гэта скарачэнне ад палімеразнай ланцуговай рэакцыі . Яна выкарыстоўваецца для выяўлення генетычнага матэрыялу ў нашым целе, ДНК або РНК . Уявіце сабе невялікі ўзор, узяты ў вас, гэта можа быць кропля крыві або мазок з унутранага боку вашага носа. Гэты малюсенькі кавалачак ДНК або РНК з гэтага ўзору бярэцца, і ў лабараторыі робяць мільёны, а можа, і мільярды копій. Гэта тое, што навукоўцы называюць ампліфікацыяй , што азначае «павелічэнне» або «памнажэнне». Гэта як рабіць шмат копій аднаго аркуша паперы з дапамогай капіравальнай машыны.

Робячы шмат такіх копій, навукоўцам лягчэй вывучаць ДНК або РНК у зыходным невялікім узоры і бачыць, ці ёсць у ім што-небудзь асаблівае. ПЦР належыць да групы тэстаў пад назвай тэсты ампліфікацыі нуклеінавых кіслот (NAAT) .

Нягледзячы на ​​тое, што многія чулі слова ПЦР у сувязі з тэставаннем на Covid-19, гэтая тэхналогія выкарыстоўваецца ў медыцынскай сферы ўжо даўно і з'яўляецца вельмі карысным метадам.

Што можна выявіць з дапамогай ПЛР?

Зараз давайце паглядзім, што можа выявіць гэты ПЛР-тэст. Многія думаюць, што ён толькі для Covid-19. Але гэта не так. Зірніце:

• Інфекцыйныя захворванні: ПЛР можа дапамагчы вызначыць, ці выклікана ліхаманка, прастуда або кашаль вірусам , бактэрыямі , грыбком або паразітам . Напрыклад:
• Вірус SARS-CoV-2 , які выклікае COVID-19 (COVID-19) .
• Грып , менавіта так мы звычайна называем грып.
• Рэспіраторна-сінцытыяльны вірус (РСВ), які асабліва распаўсюджаны ў маленькіх дзяцей.
• Бактэрыі, якія выклікаюць туберкулёз.
• Шмат іншых вірусных і бактэрыяльных інфекцый.
• Генетычныя захворванні: у некаторых людзей ёсць генетычныя захворванні, якія перадаюцца па спадчыне, ці не так? Такія захворванні, напрыклад , мукавісцыдоз.Гэтая ПЛР таксама выкарыстоўваецца для дыягностыкі такіх захворванняў, як хвароба Хантынгтана і сіндром ломкай Х-хромосомы . Гэта вельмі складаныя захворванні, таму ранняе выяўленне вельмі важнае для лячэння.
• Тыпы раку: Гэты метад таксама дапамагае вызначыць некаторыя тыпы раку, такія як лімфома .
• Змены генаў пры раку: пры лячэнні чалавека з ракам гэты ПЛР-тэст таксама можа выявіць спецыфічныя варыяцыі/мутацыі генаў у гэтых ракавых клетках. Гэта дазволіць выкарыстоўваць мэтанакіраваную тэрапію, накіраваную на гэтыя канкрэтныя змены. Гэта значны прагрэс у галіне лячэння раку.
• Рызыка захворванняў у будучыні: людзі з пэўнымі генетычнымі зменамі могуць мець больш высокі рызыка развіцця сур'ёзных захворванняў, такіх як рак, у будучыні. Гэтая ПЛР таксама выкарыстоўваецца для генетычнага тэсціравання на рызыку раку . Гэта дазваляе вам быць у курсе загадзя і пры неабходнасці змяніць лад жыцця або заставацца пільнымі, рэгулярна праходзячы тэставанне.
• Прэнатальнае тэставанне: ПЛР таксама дапамагае ў тэстах, якія праводзяцца для вызначэння наяўнасці генетычнага захворвання ў ненароджанага дзіцяці цяжарнай жанчыны.

Акрамя таго, вы маглі бачыць гэта ў фільмах, дзе для ідэнтыфікацыі злачынца бяруць доказы ДНК, такія як малюсенькі валасок або пляма крыві, знойдзеныя на месцы злачынства. Судова-медыцынскія лабараторыі таксама выкарыстоўваюць гэтую тэхналогію ПЛР для павелічэння колькасці ДНК і правядзення аналізаў.

Якія тэсты і метады выкарыстоўваюць тэхналогію ПЛР?

Тэхналогія ПЛР выкарыстоўваецца ў розных метадах тэсціравання. Тып тэсту, для якога вам трэба ўзяць узор, будзе залежаць ад таго, на што вы робіце аналіз. Вось некалькі прыкладаў:

• Аналізы крыві: бярэцца ўзор крыві, і ПЛР выкарыстоўваецца для выяўлення генетычных змен і некаторых інфекцыйных захворванняў.
• Мазок з насаглоткі: узор слізі, узяты з унутранай часткі носа або горла, можа быць выкарыстаны для праверкі на рэспіраторныя інфекцыі, такія як грып, COVID-19 і РСВ. З гэтым мы ўсе сутыкнуліся падчас COVID.
• Перадымплантацыйная генетычная дыягностыка (ПГД) або перадімплантацыйны генетычны скрынінг (ПГС): падчас працэсу экстракарпаральнага апладнення (ЭКА) у эмбрыёнаў бяруць некалькі клетак і правяраюць іх на генетычныя захворванні перад імплантацыяй у матку маці. Звычайна гэта робіцца праз некалькі дзён пасля атрымання яйкаклетак.
• Амніяцэнтэз:Падчас цяжарнасці невялікая колькасць амніятычнай вадкасці, якая акружае дзіця ў чэраве маці, можа быць выкарыстана для праверкі генетычнага статусу дзіцяці з дапамогай ПЛР. Гэты тэст праводзіцца лекарам-спецыялістам.
• Біяпсія: для выяўлення генетычных мутацый у ракавых клетках (малекулярнае тэставанне) бярэцца невялікі ўзор пухліны (біяпсія пухліны) або біяпсія касцявога мозгу. Гэта падобна на невялікую хірургічную аперацыю. Затым узор выкарыстоўваецца для правядзення ПЛР для пошуку генетычных змен.

Як вы рыхтуецеся да гэтага тэсту?

У большасці выпадкаў для ПЛР-тэсту не патрабуецца спецыяльнай падрыхтоўкі. Аднак гэта залежыць ад таго, на што вы робіце аналіз і які метад выкарыстоўваецца для збору ўзору. Напрыклад, некаторыя аналізы крыві могуць запатрабаваць ад вас некалькі гадзін галадання. Таму лепш за ўсё спытаць у лекара або ў цэнтры тэсціравання, ці ёсць якія-небудзь асаблівыя патрабаванні.

Як працуе ПЦР? Трохі навукі!

Гэта крыху навуковая гісторыя, але дазвольце мне растлумачыць яе проста. ПЛР ідэнтыфікуе паслядоўнасць, унікальную для ДНК, якую вы хочаце знайсці, гэта значыць спецыфічную для яе. Гэтая паслядоўнасць можа быць спецыфічнай генетычнай зменай у раку або генетычным кодам віруса ці бактэрыі. Гэта называецца мэтавай ДНК .

Назва «палімеразная ланцуговая рэакцыя» адносіцца да працэсу, пры якім у лабараторыі ствараецца (ампліфікуецца) вялікая колькасць копій мэтавай ДНК. У гэтым працэсе выкарыстоўваецца фермент пад назвай ДНК-палімераза . Гэты фермент стварае копіі мэтавай ДНК, калі яна прысутнічае ва ўзоры.

Гэтая «ланцуговая рэакцыя» адбываецца, калі раствор праходзіць праз мноства цыклаў награвання і астуджэння. За адзін цыкл колькасць ДНК можа падвоіцца. Уявіце сабе гэта як адзін да двух, два да чатырох, чатыры да васьмі... і гэтак далей, у рэшце рэшт ствараючы мільёны копій. Перавага гэтага заключаецца ў тым, што ПЦР можа выявіць нават невялікую колькасць ДНК або РНК, якую ў адваротным выпадку прапусцілі б іншыя тэсты.

Часта пасля правядзення ПЛР навукоўцам даводзіцца праводзіць дадатковыя тэсты для аналізу ампліфікаванай ДНК. Але часам падчас працэсу ПЛР у раствор дадаюць спецыяльныя меткі, якія могуць вызначыць, ці з'яўляецца ўзор станоўчым, ці адмоўным. Гэты метад можна выкарыстоўваць для хуткага атрымання вынікаў, асабліва пры пошуку інфекцый, такіх як вірусы.

Якія віды ПЛР існуюць?

Існуюць розныя тыпы ПЛР. Некаторыя патрабуюць дадатковых крокаў для капіявання або аналізу ДНК. Давайце разгледзім два асноўныя тыпы:

1. ПЦР з зваротнай транскрыптазай (ПЦР-ЗТ)

Уявіце, што генетычная інфармацыя, якую мы хочам скапіяваць і знайсці, знаходзіцца не ў ДНК, а ў РНК. (Напрыклад, вірус Covid-19 мае РНК). Затым, у гэтай RT-PCR , РНК (RNA) спачатку пераўтвараецца ў ДНК з дапамогай спецыяльнага фермента (зваротнай транскрыптазы). ДНК, якая ўтвараецца, называецца камплементарнай ДНК (кДНК) . Пасля гэтага праводзіцца звычайны працэс ПЛР, згаданы раней. Таму што звычайную ПЛР можна правесці толькі на ДНК.

2. ПЦР у рэжыме рэальнага часу / колькасная ПЦР (Q-ПЦР)

Пры гэтым адбываецца наступнае: па меры стварэння копій ДНК да іх дадаюцца спецыяльныя флуарэсцэнтныя меткі . Гэтыя меткі выпраменьваюць святло, калі звязваюцца з мэтавай ДНК. Затым, без дадатковага тэставання, тыя, хто праводзіць тэст, могуць у рэжыме рэальнага часу ўбачыць, ці прысутнічае адпаведная ДНК ва ўзоры. Больш за тое, яны таксама могуць атрымаць колькаснае ўяўленне аб тым, колькі яе прысутнічае.

Блытаніна ў тым, што некаторыя людзі таксама называюць гэта "ПЦР у рэжыме рэальнага часу". Але гэта не тое ж самае, што ПЦР з зваротнай транскрыптазай, згаданая раней. Акрамя таго, гэты метад ПЦР у рэжыме рэальнага часу можа выкарыстоўвацца ў спалучэнні з ПЦР з зваротнай транскрыптазай, згаданай раней. Тады гэта называецца ПЦР у рэжыме рэальнага часу (ПЦР у рэжыме рэальнага часу) . Гэты метад ПЦР у рэжыме рэальнага часу выкарыстоўваецца для тэстаў мазкоў з носа для выяўлення РНК-вірусаў, такіх як Covid-19 і грып.

Што нам кажуць вынікі ПЛР-тэсту?

Калі вы атрымаеце вынікі ПЛР-тэсту, фармулёўка можа крыху адрознівацца ў залежнасці ад таго, на што вас тэставалі.

• Звычайна, калі ў выніку тэсту пазначана «выяўлена» або «прысутнічае», гэта азначае, што ў вас ёсць генетычная мутацыя або інфекцыя, якую шукаў тэст.
• Калі вынік паказвае «не выяўлена», гэта азначае, што тэст не змог знайсці мэтавую ДНК або РНК, якая тэставалася. Аднак у выпадку інфекцыі гэта часам можа азначаць, што тэст быў зроблены занадта рана. Інфекцыя можа быць усё яшчэ жывой, але на той момант віруса або бактэрый можа быць недастаткова для выяўлення з дапамогай ПЛР.

Як інтэрпрэтаваць вынікі ПЛР на Covid-19?

Гэта тое, з чым зараз знаёмыя многія людзі.

• Станоўчы вынік ПЛР на COVID — гэта значыць, у вашай справаздачы пазначана «Выяўлена» — азначае, што вы , верагодна, інфікаваныя COVID-19 або нядаўна вылечыліся ад COVID-19 (часам ПЛР можа заставацца станоўчым на працягу некаторага часу пасля выздараўлення).
• Калі вы атрымалі адмоўны вынік ПЛР на COVID («Не выяўлена»), гэта азначае, што ў вас, хутчэй за ўсё, не было COVID-19, калі вы бралі мазок з носа. Аднак, як я ўжо згадваў раней, часам на ранніх стадыях інфекцыі, асабліва калі ў вас няма сімптомаў, ПЛР-тэсты могуць быць адмоўнымі. Таму, калі ў вас ёсць сімптомы, ваш лекар можа парэкамендаваць вам прайсці паўторнае абследаванне праз некалькі дзён.

Колькі часу патрабуецца, каб атрымаць вынікі ПЛР?

Гэта таксама залежыць ад праведзенага тэсту.

• Вынікі аналізу мазкоў з носа на распаўсюджаныя вірусы, такія як грып і COVID-19, звычайна патрабуюцца ад некалькіх гадзін да дня .
• Генетычныя тэсты, якія выкарыстоўваюць аналізы крыві і метады біяпсіі, могуць заняць тыдзень ці больш , каб атрымаць вынікі, таму што працэс аналізу крыху больш складаны.

Калі трэба звярнуцца да лекара?

Калі ў вас ёсць якія-небудзь пытанні ці праблемы з ПЛР-тэстам або яго вынікамі, абавязкова звярніцеся да лекара. Ён зможа вам усё растлумачыць.

Найважнейшае пасланне, якое трэба забраць дадому

Нягледзячы на ​​тое, што словы «ПЛР-тэст» нечакана ўвайшлі ў нашу штодзённую размову падчас пандэміі COVID-19 у 2020 годзе, насамрэч гэта вельмі каштоўная тэхналогія, якую лекары выкарыстоўваюць ужо некалькі дзесяцігоддзяў. ПЛР дапамагае ідэнтыфікаваць і капіяваць невялікую колькасць ДНК або РНК, што можна выкарыстоўваць для дыягностыкі розных захворванняў.

Хоць для лекараў гэта звычайная практыка, для вас аналіз можа быць незвычайным. Мы разумеем гэта. Але самае лепшае, што патрабуецца толькі невялікі ўзор вашага цела, і працэдура звычайна займае ўсяго некалькі хвілін. Калі ў вас ёсць якія-небудзь пытанні, праблемы або сумневы з гэтай нагоды, звярніцеся да лекара. Ён усё вам растлумачыць. Будзьце здаровыя!

ПЦР -тэст, ДНК, РНК, генетычнае тэставанне, дыягностыка, Covid-19, вірус