Что такое ПЦР-тест? Давайте разберемся!

Когда мы слышим слово ПЦР, мы сразу вспоминаем пандемию COVID-19, верно? Время, когда нам приходилось вставлять ватный тампон в нос и ждать результатов... это никогда не забудется. Но знаете ли вы, что ПЦР используется не только для выявления COVID-19? На самом деле это очень важный тест, совершивший огромный прорыв в медицинской науке. Поэтому сегодня давайте поговорим о том, что такое ПЦР-тест, что еще он может выявить и как он работает, простым и понятным языком.

Что такое ПЦР в простом виде?

Хорошо, давайте представим, что вам нужно найти одно-единственное слово на одной-единственной странице одной-единственной книги среди тысяч книг в огромной библиотеке. Насколько это было бы сложно? Это как найти крошечный фрагмент ДНК или РНК , генетического материала внутри клеток нашего организма.

Технология ПЦР (полимеразной цепной реакции) значительно упрощает эту сложную задачу. Она позволяет копировать мельчайшие фрагменты ДНК или РНК, которые мы ищем, сотни тысяч, даже миллионы раз (амплификация). Это как найти страницу с нужным словом в библиотечной книге, вставить её в копировальный аппарат и сделать около миллиона копий. Затем, поскольку это труднодоступное слово теперь повсюду, мы можем легко его идентифицировать.

Проще говоря, ПЦР — это тест, при котором берётся очень небольшое количество клетки из нашего организма, капля крови или мазок из носа, и в лаборатории искусственно выращивается определённый фрагмент ДНК или РНК, чтобы подтвердить наличие или отсутствие вируса в образце. Это очень чувствительный тест. Это означает, что он может обнаружить даже очень малые количества вируса. Этот метод относится к группе тестов, называемых тестами амплификации нуклеиновых кислот (NAAT).

Какие заболевания можно выявить с помощью ПЦР-тестирования?

Хотя ПЦР-тесты стали популярными из-за пандемии COVID-19, в медицине они используются уже несколько десятилетий. С помощью этого теста можно выявить множество заболеваний. Рассмотрим некоторые из основных.

Как взять образец для ПЦР-теста?

Способ взятия образца для ПЦР-теста зависит от того, какое заболевание вы хотите выявить. Метод взятия образца различен для каждого заболевания.

В большинстве случаев для подготовки к ПЦР-тесту не требуется никаких специальных действий. Однако в некоторых случаях, например, при проведении биопсии, врач предоставит вам необходимые инструкции заранее.

Как работает технология ПЦР?

Итак, давайте теперь посмотрим, как на самом деле работает эта удивительная технология. Это немного научно, но я объясню это простым языком.

1. Подготовка образца: Сначала из взятого у вас образца (крови, выделений и т. д.) выделяют ДНК или РНК.

2. Приготовление смеси: Затем выделенная ДНК/РНК смешивается с некоторыми специальными химическими веществами. Главным компонентом этой смеси является фермент, называемый ДНК-полимеразой . Именно он выполняет функцию копирования.

3. Цикл нагрева и охлаждения: Теперь тонкая трубка с этой смесью помещается в специальный аппарат. Этот аппарат очень быстро повышает и понижает температуру.

• Денатурация: Сначала температура повышается примерно до 95 градусов Цельсия. Это приводит к разделению двух нитей ДНК.
• Отжиг: Затем температура понижается примерно до 55 градусов. После этого к разделенным нитям ДНК присоединяются небольшие фрагменты ДНК (праймеры), соответствующие искомому фрагменту ДНК.
• Повторный нагрев (удлинение): Затем температура повышается примерно до 72 градусов. После этого вступает в действие фермент ДНК-полимераза, который создает новую нить ДНК из этого праймера, соответствующую исходной нити ДНК.

4. Копирование: Теперь созданы две копии одной нити ДНК. Этот температурный цикл повторяется примерно 30-40 раз. За один цикл количество ДНК удваивается. Две становятся четырьмя, четыре — восемью, восемь — шестнадцатью... После примерно 30 циклов из исходного единственного фрагмента ДНК создается более миллиарда копий.

Теперь этот фрагмент ДНК/РНК, который ранее был слишком мал для обнаружения, стал достаточно большим, чтобы его можно было легко обнаружить.

Существуют ли различные виды ПЦР-тестов?

Да, в основном, нам нужно знать о двух типах.

• Обратная транскриптазная ПЦР (ОТ-ПЦР): Некоторые вирусы, такие как COVID-19, грипп и ВИЧ, хранят свою генетическую информацию в РНК, а не в ДНК. Обычная ПЦР может копировать только ДНК. Поэтому в ОТ-ПЦР сначала используется специальный фермент («обратная транскриптаза») для «преобразования» этой РНК в ДНК. Полученная ДНК называется комплементарной ДНК (кДНК). Затем происходит обычный процесс ПЦР.

• ПЦР в реальном времени / Количественная ПЦР (К-ПЦР): Это несколько более продвинутый метод. В нем происходит следующее: по мере копирования ДНК к ней присоединяется флуоресцентная метка. По мере увеличения количества скопированной ДНК увеличивается и флуоресценция. Прибор может измерить эту флуоресценцию. Таким образом, пока мы ждем, то есть в реальном времени , мы можем видеть, присутствует ли соответствующая ДНК в образце или нет. Более того, это также может дать приблизительное представление о количестве вируса в исходном образце (вирусная нагрузка). Тест ПЦР в реальном времени , сочетающий оба этих метода, часто используется для выявления COVID-19.

Что означает результат ПЦР-теста?

Очень важно понимать результаты ПЦР-теста, когда вы их получаете.

• Обнаружено / Положительный результат: Если в вашем отчете указано «Обнаружено» или «Положительный результат», это означает, что в вашем образце были обнаружены фрагменты вируса или генетический материал, которые искали. Проще говоря, у вас, вероятно, есть инфекция.

• Не обнаружено / Отрицательный результат: Это означает, что соответствующие фрагменты ДНК/РНК не были обнаружены в исследованном образце. Это значит, что у вас, скорее всего, нет этой инфекции.

Время получения результатов зависит от проводимого теста. Результаты анализа мазков из носа (например, на COVID-19 или грипп) обычно становятся ясны в течение 24 часов. Однако анализы крови и биопсия для выявления генетических заболеваний могут занять неделю или больше.

Если у вас возникли какие-либо вопросы или опасения по поводу ПЦР-теста или его результатов, обязательно обсудите это со своим врачом.