Ας μάθουμε για το τεστ PCR απλά, όπως από έναν φίλο!

Ίσως θυμάστε ότι κατά τη διάρκεια της πανδημίας Covid-19, όλοι μιλούσαμε για το τεστ PCR . Κάποιοι πρέπει να φοβήθηκαν λίγο, σκεπτόμενοι ένα ραβδί που εισάγεται στη μύτη; Αλλά τι ακριβώς είναι αυτό το τεστ PCR; Μπορεί να ανιχνεύσει μόνο τον Covid-19; Όχι, η PCR είναι μια πολύ σημαντική μέθοδος εξέτασης στην ιατρική που βοηθά σε πολλά πράγματα. Ας μιλήσουμε για όλα αυτά σήμερα, απλά και καθαρά, σαν να μιλάμε σε έναν καλό φίλο.

Τι είναι η PCR; Μπορείτε να την εξηγήσετε λίγο;

Με απλά λόγια, η PCR είναι η συντομογραφία του Polymerase Chain Reaction (Αλυσιδωτή Αντίδραση Πολυμεράσης ). Χρησιμοποιείται για την ανίχνευση γενετικού υλικού στο σώμα μας, είτε DNA είτε RNA . Φανταστείτε ένα μικρό δείγμα που λαμβάνεται από εσάς, θα μπορούσε να είναι μια σταγόνα αίματος ή ένα στυλεό από το εσωτερικό της μύτης σας. Αυτό το μικροσκοπικό κομμάτι DNA ή RNA σε αυτό το δείγμα λαμβάνεται και εκατομμύρια, ίσως δισεκατομμύρια, αντίγραφα δημιουργούνται στο εργαστήριο. Αυτό είναι που οι επιστήμονες ονομάζουν ενίσχυση , που σημαίνει «αύξηση» ή «πολλαπλασιασμός». Είναι σαν να δημιουργείτε πολλά αντίγραφα ενός μόνο φύλλου χαρτιού με ένα φωτοτυπικό μηχάνημα.

Δημιουργώντας πολλά αντίγραφα όπως αυτό, γίνεται ευκολότερο για τους επιστήμονες να μελετήσουν το DNA ή το RNA στο αρχικό μικρό δείγμα και να δουν αν υπάρχει κάτι ιδιαίτερο σε αυτό. Η PCR ανήκει σε μια ομάδα δοκιμών που ονομάζονται Δοκιμές Ενίσχυσης Νουκλεϊκού Οξέος (NAAT) .

Αν και πολλοί άνθρωποι έχουν ακούσει τη λέξη PCR σε σχέση με τα τεστ για την Covid-19, αυτή η τεχνολογία χρησιμοποιείται στον ιατρικό τομέα εδώ και πολύ καιρό και είναι μια πολύ χρήσιμη μέθοδος.

Τι μπορεί να ανιχνευθεί με PCR;

Ας δούμε τώρα τι είδους πράγματα μπορεί να ανιχνεύσει αυτό το τεστ PCR. Πολλοί άνθρωποι πιστεύουν ότι είναι μόνο για την Covid-19. Αλλά αυτό δεν ισχύει. Ρίξτε μια ματιά:

• Λοιμώδη νοσήματα: Η PCR μπορεί να βοηθήσει στον προσδιορισμό του εάν ο πυρετός, το κρυολόγημα ή ο βήχας που έχετε προκαλούνται από ιό , βακτήριο , μύκητα ή παράσιτο . Για παράδειγμα:
• Ο ιός SARS-CoV-2 που προκαλεί την COVID-19 (COVID-19) .
• Γρίπη , αυτό ονομάζουμε συνήθως γρίπη.
• Αναπνευστικός Συγκυτιακός Ιός (RSV), ο οποίος είναι ιδιαίτερα συχνός σε μικρά μωρά.
• Τα βακτήρια που προκαλούν φυματίωση.
• Πολλές άλλες ιογενείς και βακτηριακές λοιμώξεις.
• Γενετικές ασθένειες: Μερικοί άνθρωποι έχουν γενετικές ασθένειες που κληρονομούνται, σωστά; Ασθένειες όπως αυτή, για παράδειγμα , η Κυστική Ίνωση.Αυτή η PCR χρησιμοποιείται επίσης για τη διάγνωση παθήσεων όπως η νόσος του Huntington και το σύνδρομο Fragile X. Αυτές είναι πολύπλοκες παθήσεις, επομένως η έγκαιρη ανίχνευση είναι πολύ σημαντική για τη θεραπεία.
• Είδη καρκίνου: Αυτή η μέθοδος βοηθά επίσης στην αναγνώριση ορισμένων τύπων καρκίνου, όπως το λέμφωμα .
• Γονιδιακές αλλαγές στον καρκίνο: Κατά τη θεραπεία ενός ατόμου με καρκίνο, αυτή η εξέταση PCR μπορεί επίσης να ανιχνεύσει συγκεκριμένες γονιδιακές παραλλαγές/μεταλλάξεις σε αυτά τα καρκινικά κύτταρα. Αυτό θα επιτρέψει τη χρήση στοχευμένης θεραπείας για τη στόχευση αυτών των συγκεκριμένων αλλαγών. Πρόκειται για μια σημαντική πρόοδο στον τομέα της θεραπείας του καρκίνου.
• Μελλοντικός κίνδυνος ασθένειας: Άτομα με ορισμένες γενετικές αλλαγές ενδέχεται να διατρέχουν υψηλότερο κίνδυνο εμφάνισης σοβαρών ασθενειών όπως ο καρκίνος στο μέλλον. Αυτή η PCR χρησιμοποιείται επίσης για γενετικές εξετάσεις για τον κίνδυνο καρκίνου . Αυτό σας επιτρέπει να είστε ενήμεροι εκ των προτέρων και να κάνετε αλλαγές στον τρόπο ζωής σας, εάν είναι απαραίτητο, ή να παραμένετε σε εγρήγορση υποβαλλόμενοι σε τακτικές εξετάσεις.
• Προγεννητικός έλεγχος: Η PCR είναι επίσης χρήσιμη σε εξετάσεις που πραγματοποιούνται για να διαπιστωθεί εάν το αγέννητο παιδί μιας εγκύου γυναίκας έχει κάποια γενετική πάθηση.

Όχι μόνο αυτό, αλλά μπορεί να το έχετε δει και σε ταινίες, όπου στοιχεία DNA, όπως μια μικροσκοπική τρίχα ή μια κηλίδα αίματος που βρίσκεται στον τόπο του εγκλήματος, λαμβάνονται και χρησιμοποιούνται για την αναγνώριση του εγκληματία. Τα εγκληματολογικά εργαστήρια χρησιμοποιούν επίσης αυτήν την τεχνολογία PCR για να αυξήσουν την ποσότητα του DNA και να διεξάγουν εξετάσεις.

Ποιες είναι οι εξετάσεις και οι μέθοδοι που χρησιμοποιούν την τεχνολογία PCR;

Η τεχνολογία PCR χρησιμοποιείται σε μια ποικιλία μεθόδων δοκιμών. Ο τύπος της εξέτασης για την οποία πρέπει να λάβετε δείγμα εξαρτάται από το τι εξετάζετε. Ακολουθούν ορισμένα παραδείγματα:

• Εξετάσεις αίματος: Λαμβάνεται δείγμα αίματος και χρησιμοποιείται PCR για την ανίχνευση γενετικών αλλαγών και ορισμένων μολυσματικών ασθενειών.
• Ρινοφαρυγγικό επίχρισμα: Ένα δείγμα βλέννας που λαμβάνεται από το εσωτερικό της μύτης ή του λαιμού μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον έλεγχο αναπνευστικών λοιμώξεων όπως η γρίπη, η COVID-19 και ο RSV. Αυτό είναι που όλοι έχουμε βιώσει κατά τη διάρκεια της COVID.
• Προεμφυτευτική Γενετική Διάγνωση (PGD) ή Προεμφυτευτικός Γενετικός Έλεγχος (PGS): Κατά τη διάρκεια της διαδικασίας εξωσωματικής γονιμοποίησης (IVF) , λαμβάνονται μερικά κύτταρα από τα έμβρυα και ελέγχονται για γενετικές παθήσεις πριν εμφυτευτούν στη μήτρα της μητέρας. Αυτό γίνεται συνήθως λίγες ημέρες μετά την ωοληψία.
• Αμνιοπαρακέντηση:Κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης, μια μικρή ποσότητα αμνιακού υγρού που περιβάλλει το μωρό στη μήτρα της μητέρας μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να ελεγχθεί η γενετική κατάσταση του μωρού χρησιμοποιώντας PCR. Πρόκειται για μια εξέταση που εκτελείται από εξειδικευμένο γιατρό.
• Βιοψία: Για τον εντοπισμό γενετικών μεταλλάξεων σε καρκινικά κύτταρα (μοριακός έλεγχος), λαμβάνεται ένα μικρό δείγμα του όγκου (βιοψία όγκου) ή βιοψία μυελού των οστών. Αυτό είναι σαν μια μικρή χειρουργική επέμβαση. Το δείγμα χρησιμοποιείται στη συνέχεια για την εκτέλεση PCR για την αναζήτηση γενετικών αλλαγών.

Πώς προετοιμάζεστε για αυτήν την εξέταση;

Στις περισσότερες περιπτώσεις, δεν απαιτείται ειδική προετοιμασία για μια εξέταση PCR. Ωστόσο, εξαρτάται από το τι εξετάζετε και τη μέθοδο που χρησιμοποιείται για τη συλλογή του δείγματος. Για παράδειγμα, ορισμένες εξετάσεις αίματος μπορεί να απαιτούν να είστε νηστικοί για λίγες ώρες πριν. Επομένως, είναι καλύτερο να ρωτήσετε τον γιατρό σας ή το κέντρο εξετάσεων εάν υπάρχει κάτι ιδιαίτερο που πρέπει να κάνετε.

Πώς λειτουργεί η PCR; Λίγη επιστήμη!

Αυτή είναι μια κάπως επιστημονική ιστορία, αλλά ας την εξηγήσω απλά. Αυτό που κάνει η PCR είναι να αναγνωρίσει μια αλληλουχία που είναι μοναδική για το DNA που θέλετε να αναζητήσετε, δηλαδή, ειδική για αυτό. Αυτή η αλληλουχία θα μπορούσε να είναι μια συγκεκριμένη γενετική αλλαγή σε έναν καρκίνο ή θα μπορούσε να είναι ο γενετικός κώδικας ενός ιού ή βακτηρίου. Αυτό ονομάζεται DNA-στόχος .

Η ονομασία «Αλυσιδωτή Αντίδραση Πολυμεράσης» αναφέρεται στη διαδικασία με την οποία ένας μεγάλος αριθμός αντιγράφων ενός DNA-στόχου παράγεται (ενισχύεται) στο εργαστήριο. Αυτή η διαδικασία χρησιμοποιεί ένα ένζυμο που ονομάζεται DNA πολυμεράση . Αυτό το ένζυμο δημιουργεί αντίγραφα του DNA-στόχου, εάν υπάρχει στο δείγμα.

Αυτή η «αλυσιδωτή αντίδραση» συμβαίνει όταν ένα διάλυμα περνάει από πολλούς κύκλους θέρμανσης και ψύξης. Σε έναν κύκλο, η ποσότητα του DNA μπορεί να διπλασιαστεί. Σκεφτείτε το ως ένα προς δύο, δύο προς τέσσερα, τέσσερα προς οκτώ... και ούτω καθεξής, δημιουργώντας τελικά εκατομμύρια αντίγραφα. Το πλεονέκτημα αυτού είναι ότι η PCR μπορεί να ανιχνεύσει ακόμη και μικρές ποσότητες DNA ή RNA που διαφορετικά θα χάνονταν από άλλες δοκιμές.

Συχνά, μετά την ολοκλήρωση της PCR, οι επιστήμονες πρέπει να κάνουν περισσότερες εξετάσεις για να αναλύσουν το ενισχυμένο DNA. Ωστόσο, μερικές φορές, προστίθενται ειδικές ετικέτες στο διάλυμα κατά τη διάρκεια της διαδικασίας PCR, οι οποίες μπορούν να διακρίνουν εάν το δείγμα είναι θετικό ή αρνητικό. Αυτή η μέθοδος μπορεί να χρησιμοποιηθεί για γρήγορη λήψη αποτελεσμάτων, ειδικά όταν αναζητούνται λοιμώξεις όπως ιοί.

Ποιοι τύποι PCR υπάρχουν;

Υπάρχουν διαφορετικοί τύποι PCR. Μερικοί απαιτούν πρόσθετα βήματα για την αντιγραφή ή την ανάλυση του DNA. Ας δούμε δύο κύριους τύπους:

1. PCR αντίστροφης μεταγραφάσης (RT-PCR)

Φανταστείτε ότι οι γενετικές πληροφορίες που θέλουμε να αντιγράψουμε και να αναζητήσουμε δεν βρίσκονται στο DNA, αλλά στο RNA. (Για παράδειγμα, ο ιός Covid-19 έχει RNA). Στη συνέχεια, σε αυτήν την RT-PCR , αυτό που γίνεται είναι ότι το RNA (RNA) μετατρέπεται πρώτα σε DNA χρησιμοποιώντας ένα ειδικό ένζυμο (αντίστροφη μεταγραφάση). Το DNA που σχηματίζεται ονομάζεται συμπληρωματικό DNA (cDNA) . Μετά από αυτό, πραγματοποιείται η κανονική διαδικασία PCR που αναφέρθηκε προηγουμένως. Διότι, η κανονική PCR μπορεί να γίνει μόνο σε DNA.

2. PCR πραγματικού χρόνου / Ποσοτική PCR (Q-PCR)

Αυτό που συμβαίνει σε αυτό είναι ότι καθώς δημιουργούνται τα αντίγραφα του DNA, προστίθενται σε αυτό ειδικές φθορίζουσες ετικέτες . Αυτές οι ετικέτες εκπέμπουν φως όταν συνδέονται με το DNA-στόχο. Στη συνέχεια, χωρίς πρόσθετες δοκιμές, όσοι κάνουν τη δοκιμή μπορούν να δουν σε πραγματικό χρόνο εάν το σχετικό DNA υπάρχει στο δείγμα. Όχι μόνο αυτό, αλλά μπορούν επίσης να πάρουν μια ποσοτική ιδέα για την ποσότητα που υπάρχει.

Το περίεργο είναι ότι κάποιοι την αποκαλούν και «RT-PCR». Αλλά δεν είναι η ίδια με την PCR αντίστροφης μεταγραφάσης που αναφέρθηκε προηγουμένως. Επίσης, αυτή η μέθοδος PCR πραγματικού χρόνου μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε συνδυασμό με την PCR αντίστροφης μεταγραφάσης που αναφέρθηκε προηγουμένως. Τότε ονομάζεται RT-PCR πραγματικού χρόνου (real-time RT-PCR) . Αυτή η μέθοδος RT-PCR πραγματικού χρόνου χρησιμοποιείται για ρινικές εξετάσεις με επιχρίσματα για την ανίχνευση ιών RNA όπως η Covid-19 και η γρίπη.

Τι μας λένε τα αποτελέσματα ενός τεστ PCR;

Όταν λάβετε τα αποτελέσματα ενός τεστ PCR, η διατύπωση μπορεί να είναι ελαφρώς διαφορετική, ανάλογα με το τι εξετάσατε.

• Γενικά, εάν το αποτέλεσμά σας λέει «ανιχνεύτηκε» ή «παρούσα», αυτό σημαίνει ότι έχετε τη γενετική μετάλλαξη ή λοίμωξη που αναζήτησε η εξέταση.
• Εάν το αποτέλεσμα αναφέρει «δεν ανιχνεύθηκε», αυτό σημαίνει ότι η εξέταση δεν μπόρεσε να βρει το DNA ή RNA-στόχο που ελέγχθηκε. Ωστόσο, σε περίπτωση λοίμωξης, αυτό μπορεί μερικές φορές να σημαίνει ότι κάνατε την εξέταση πολύ νωρίς στη διαδικασία της λοίμωξης. Μπορεί να εξακολουθείτε να έχετε τη λοίμωξη, αλλά μπορεί να μην υπάρχει αρκετός ιός ή βακτήριο για να ανιχνευθεί με PCR εκείνη τη στιγμή.

Πώς ερμηνεύονται τα αποτελέσματα της PCR για την Covid-19;

Αυτό είναι κάτι με το οποίο πολλοί άνθρωποι είναι πλέον εξοικειωμένοι.

• Ένα θετικό αποτέλεσμα PCR COVID - που σημαίνει ότι η αναφορά σας αναφέρει «Εντοπίστηκε» - σημαίνει ότι πιθανότατα έχετε μολυνθεί με COVID-19 ή έχετε αναρρώσει πρόσφατα από την COVID-19 (μερικές φορές η PCR μπορεί να παραμείνει θετική για κάποιο χρονικό διάστημα μετά την ανάρρωση).
• Εάν λάβετε αρνητικό αποτέλεσμα ("Δεν ανιχνεύθηκε") για την εξέταση PCR COVID, αυτό σημαίνει ότι πιθανότατα δεν είχατε COVID-19 όταν πήρατε το ρινικό δείγμα. Ωστόσο, όπως ανέφερα προηγουμένως, μερικές φορές, στα πρώτα στάδια μιας λοίμωξης, ειδικά εάν είστε ασυμπτωματικοί, τα τεστ PCR μπορεί να είναι αρνητικά. Επομένως, εάν έχετε συμπτώματα, ο γιατρός σας μπορεί να σας συμβουλεύσει να κάνετε ξανά το τεστ σε λίγες ημέρες.

Πόσος χρόνος χρειάζεται για να λάβω αποτελέσματα PCR;

Αυτό ποικίλλει επίσης ανάλογα με την εξέταση που εκτελείται.

• Οι ρινικές εξετάσεις για κοινούς ιούς όπως η γρίπη και η COVID-19 συνήθως χρειάζονται μερικές ώρες ή μία ημέρα για να παράγουν αποτελέσματα.
• Οι γενετικές εξετάσεις που χρησιμοποιούν εξετάσεις αίματος και μεθόδους βιοψίας μπορεί να χρειαστούν μία εβδομάδα ή και περισσότερο για να λάβουν αποτελέσματα, επειδή η διαδικασία ανάλυσης είναι λίγο πιο περίπλοκη.

Πότε χρειάζεται να επισκεφτείτε έναν γιατρό;

Εάν έχετε οποιεσδήποτε ερωτήσεις ή ανησυχίες σχετικά με ένα τεστ PCR ή τα αποτελέσματά του, φροντίστε να μιλήσετε με τον γιατρό σας. Μπορεί να σας εξηγήσει τα πάντα.

Το πιο σημαντικό μήνυμα που πρέπει να πάρετε σπίτι

Αν και οι λέξεις «τεστ PCR» μπήκαν ξαφνικά στην καθημερινή μας συζήτηση με την πανδημία COVID-19 του 2020, στην πραγματικότητα πρόκειται για μια πολύτιμη τεχνολογία που οι γιατροί χρησιμοποιούν εδώ και δεκαετίες. Η PCR βοηθά στην αναγνώριση και την αντιγραφή μικροσκοπικών ποσοτήτων DNA ή RNA, οι οποίες μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τη διάγνωση μιας ποικιλίας παθήσεων.

Ενώ αυτό είναι σύνηθες για τους γιατρούς, μπορεί να μην είναι συνηθισμένο για εσάς να κάνετε μια εξέταση. Το καταλαβαίνουμε αυτό. Αλλά το καλύτερο είναι ότι απαιτεί μόνο ένα μικρό δείγμα του σώματός σας και η διαδικασία συνήθως διαρκεί μόνο λίγα λεπτά. Εάν έχετε οποιεσδήποτε ερωτήσεις, ανησυχίες ή αμφιβολίες σχετικά με αυτό, μιλήστε με τον γιατρό σας. Θα σας εξηγήσει τα πάντα. Να είστε υγιείς!

` Τεστ PCR, DNA, RNA, γενετικός έλεγχος, διάγνωση, Covid-19, ιός