O que é um teste PCR? Vamos falar sobre isso de forma simples!

Quando ouvimos a sigla PCR, pensamos na pandemia de Covid, certo? Na época em que tínhamos que enfiar um cotonete no nariz e esperar o resultado... isso jamais será esquecido. Mas você sabia que o PCR não é usado apenas para detectar a Covid? Na verdade, trata-se de um teste muito importante que representou um grande avanço na ciência médica. Então, hoje, vamos falar sobre o que é o teste PCR, o que mais ele pode detectar e como funciona, de uma forma simples e fácil de entender.

O que é PCR, em termos simples?

Certo, vamos colocar desta forma. Imagine que você tivesse que encontrar uma única palavra em uma única página de um único livro, dentre milhares de livros em uma grande biblioteca. Quão difícil seria isso? É como encontrar um minúsculo fragmento de DNA ou RNA , o material genético dentro das células do nosso corpo.

A tecnologia PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) facilita essa tarefa difícil. O que ela faz é copiar o menor fragmento de DNA ou RNA que estamos procurando centenas de milhares, até milhões de vezes (amplificação). É como encontrar a página com a palavra em um livro da biblioteca, colocá-la em uma fotocopiadora e fazer cerca de um milhão de cópias. Então, como essa palavra difícil de encontrar agora está em todos os lugares, podemos identificá-la facilmente.

Em termos simples, o PCR é um teste que utiliza uma quantidade muito pequena de uma célula do nosso corpo, como uma gota de sangue ou um cotonete nasal, e cultiva artificialmente um fragmento específico de DNA ou RNA em laboratório para confirmar a presença ou não do vírus na amostra. Este é um teste muito sensível, o que significa que pode detectar até mesmo quantidades mínimas do vírus. Este método pertence a um grupo de testes chamado Teste de Amplificação de Ácido Nucleico (TAAN).

Que doenças podem ser detectadas pelo teste PCR?

Embora o PCR tenha se popularizado devido à pandemia de COVID-19, ele já era utilizado na área médica há décadas. Há muitas coisas que podem ser detectadas com esse teste. Vejamos algumas das principais.

Como se coleta uma amostra para um teste PCR?

A forma de coletar uma amostra para um teste de PCR depende do tipo de doença que se está investigando. O método de coleta da amostra é diferente para cada condição.

Na maioria das vezes, você não precisa fazer nada de especial para se preparar para um teste PCR. No entanto, em alguns casos, como quando se realiza uma biópsia, por exemplo, seu médico lhe dará as instruções necessárias com antecedência.

Como funciona a tecnologia PCR?

Certo, agora vamos ver como essa tecnologia incrível funciona na prática. É um pouco científico, mas vou explicar de forma simples.

1. Preparação da amostra: Primeiro, o DNA ou RNA é isolado da amostra (sangue, secreções, etc.) coletada de você.

2. Preparando a mistura: Em seguida, esse DNA/RNA isolado é misturado com alguns produtos químicos especiais. O principal componente dessa mistura é uma enzima chamada DNA polimerase . É ela que realiza o processo de fotocópia.

3. Ciclo de aquecimento e resfriamento: Agora, o pequeno tubo com essa mistura é colocado em uma máquina especial. Essa máquina eleva e abaixa a temperatura muito rapidamente.

• Desnaturação: Primeiro, a temperatura é elevada para cerca de 95 graus Celsius. Isso faz com que as duas cadeias de DNA se separem.
• Anelamento: Em seguida, a temperatura é reduzida para cerca de 55 graus. Então, pequenos pedaços de DNA (primers) que correspondem ao fragmento de DNA que estamos procurando são ligados às fitas de DNA separadas.
• Reaquecimento (Extensão): Em seguida, a temperatura é elevada para cerca de 72 graus. Então, a enzima DNA polimerase entra em ação e sintetiza uma nova fita de DNA a partir do primer, que se liga à fita de DNA original.

4. Cópia: Agora, duas cópias de uma fita de DNA foram produzidas. Esse ciclo de temperatura se repete cerca de 30 a 40 vezes. Em um ciclo, a quantidade de DNA dobra. Duas se tornam quatro, quatro se tornam oito, oito se tornam dezesseis... Após cerca de 30 ciclos, mais de um bilhão de cópias terão sido produzidas a partir do único fragmento original de DNA.

Agora, esse fragmento de DNA/RNA, que antes era pequeno demais para ser detectado, tornou-se grande o suficiente para ser facilmente detectado.

Existem diferentes tipos de testes PCR?

Sim, existem principalmente dois tipos dos quais precisamos estar cientes.

• PCR com transcriptase reversa (RT-PCR): Alguns vírus, como o da Covid-19, o da gripe e o HIV, possuem informações genéticas em RNA em vez de DNA. A PCR normal só consegue copiar DNA. Portanto, na RT-PCR, utiliza-se primeiro uma enzima especial (a transcriptase reversa) para converter esse RNA em DNA. O DNA resultante é chamado de DNA complementar (cDNA). Em seguida, ocorre o processo normal de PCR.

• PCR em tempo real / PCR quantitativo (qPCR): Este é um método um pouco mais avançado. Nele, à medida que o DNA é copiado, um marcador fluorescente é ligado a ele. Conforme a quantidade de DNA copiado aumenta, essa fluorescência também aumenta. O equipamento consegue medir essa fluorescência. Assim, enquanto aguardamos o resultado, ou seja, em tempo real , podemos verificar se o DNA relevante está presente na amostra ou não. Além disso, o teste também fornece uma estimativa da quantidade de vírus presente na amostra original (carga viral). Um teste de RT-PCR em tempo real , que combina esses dois métodos, é frequentemente usado para detectar a Covid-19.

O que significa o relatório do PCR?

É muito importante entender o relatório do PCR quando você o recebe.

• Detectado/Positivo: Se o seu relatório indicar "Detectado" ou "Positivo", significa que sua amostra continha partes do vírus ou material genético que estavam sendo procurados. Em outras palavras, você provavelmente está infectado.

• Não detectado/Negativo: Isso significa que os fragmentos de DNA/RNA relevantes não foram encontrados na amostra testada. Isso significa que você provavelmente não tem essa infecção.

O tempo necessário para obter os resultados varia dependendo do teste realizado. Os testes com cotonete nasal (como os de COVID e gripe) geralmente apresentam resultados em 24 horas. No entanto, exames de sangue e biópsias para detectar doenças genéticas podem levar uma semana ou mais.

Se você tiver alguma dúvida ou preocupação sobre um teste PCR ou seus resultados, não deixe de conversar com seu médico.