ପିସିଆର୍ ପରୀକ୍ଷା କ'ଣ? ଆସନ୍ତୁ ଏହା ବିଷୟରେ ସରଳ ଭାବରେ ଆଲୋଚନା କରିବା!

ଯେତେବେଳେ ଆମେ PCR ଶବ୍ଦଟି ଶୁଣୁ, ଆମେ କୋଭିଡ୍ ମହାମାରୀ ବିଷୟରେ ମନେ ପକାଉ, ଠିକ୍ ନା? ସେହି ସମୟ ଯେତେବେଳେ ଆମକୁ ନାକରେ ଏକ ସ୍ୱାବ୍ ଲଗାଇ ରିପୋର୍ଟ ଆସିବାକୁ ଅପେକ୍ଷା କରିବାକୁ ପଡୁଥିଲା... ତାହା କେବେ ଭୁଲିଯିବ ନାହିଁ। କିନ୍ତୁ ଆପଣ କ'ଣ ଜାଣନ୍ତି ଯେ PCR କେବଳ କୋଭିଡ୍ ଚିହ୍ନଟ କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଏ ନାହିଁ? ଏହା ପ୍ରକୃତରେ ଏକ ଅତ୍ୟନ୍ତ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପରୀକ୍ଷା ଯାହା ଚିକିତ୍ସା ବିଜ୍ଞାନରେ ଏକ ବିରାଟ ସଫଳତା ହାସଲ କରିଛି। ତେଣୁ ଆଜି, ଆସନ୍ତୁ ଏହି PCR ପରୀକ୍ଷା କ'ଣ, ଏହା ଅନ୍ୟ କେଉଁ ଜିନିଷଗୁଡ଼ିକୁ ଚିହ୍ନଟ କରିପାରିବ ଏବଂ ଏହା କିପରି କାମ କରେ ତାହା ବିଷୟରେ ଆଲୋଚନା କରିବା ଯାହା ଆପଣ ବୁଝିପାରିବେ।

PCR କଣ ସରଳ?

ଠିକ୍ ଅଛି, ଏହାକୁ ଏହିପରି କହିବା। କଳ୍ପନା କରନ୍ତୁ ଯେ ଆପଣଙ୍କୁ ଏକ ବଡ଼ ଲାଇବ୍ରେରୀରେ ହଜାର ହଜାର ପୁସ୍ତକ ମଧ୍ୟରୁ ଗୋଟିଏ ପୁସ୍ତକର ଗୋଟିଏ ପୃଷ୍ଠାରେ ଗୋଟିଏ ଶବ୍ଦ ଖୋଜିବାକୁ ପଡିବ। ଏହା କେତେ କଷ୍ଟକର ହେବ? ଏହା ଆମ ଶରୀରର କୋଷ ଭିତରେ ଜେନେଟିକ୍ ସାମଗ୍ରୀ, DNA କିମ୍ବା RNA ର ଏକ ଛୋଟ ଖଣ୍ଡ ଖୋଜିବା ଭଳି।

PCR (ପଲିମେରେଜ୍ ଚେନ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା) ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା ସେହି କଷ୍ଟକର କାର୍ଯ୍ୟକୁ ସହଜ କରିଥାଏ। ଏହା ଆମେ ଖୋଜୁଥିବା DNA କିମ୍ବା RNAର ସବୁଠାରୁ ଛୋଟ ଖଣ୍ଡକୁ ଲକ୍ଷ ଲକ୍ଷ, ଏପରିକି ଲକ୍ଷ ଲକ୍ଷ ଥର (ଆମ୍ପ୍ଲିଫିକେସନ୍) କପି କରିବା ଭଳି। ଏହା ଲାଇବ୍ରେରୀ ପୁସ୍ତକରେ ଶବ୍ଦ ଥିବା ପୃଷ୍ଠାଟିକୁ ଖୋଜିବା, ଏହାକୁ ଏକ ଫଟୋକପି ମେସିନରେ ରଖିବା ଏବଂ ପ୍ରାୟ ଦଶ ଲକ୍ଷ କପି ତିଆରି କରିବା ଭଳି। ତା'ପରେ, ଯେହେତୁ ସେହି କଷ୍ଟକର ଶବ୍ଦ ଏବେ ସବୁଠି ଅଛି, ଆମେ ଏହାକୁ ସହଜରେ ଚିହ୍ନଟ କରିପାରିବା।

ସରଳ ଭାଷାରେ କହିବାକୁ ଗଲେ, PCR ହେଉଛି ଏକ ପରୀକ୍ଷା ଯାହା ଆମ ଶରୀରରୁ ଏକ କୋଷ, ରକ୍ତର ଏକ ବୁନ୍ଦା, କିମ୍ବା ନାକରୁ ଏକ ସ୍ୱାବ୍ ନେଇଥାଏ ଏବଂ ଏକ ପରୀକ୍ଷାଗାରରେ ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ DNA କିମ୍ବା RNA ଖଣ୍ଡକୁ କୃତ୍ରିମ ଭାବରେ ବୃଦ୍ଧି କରିଥାଏ ଯାହା ଦ୍ୱାରା ଏହା ଆମର ନମୁନାରେ ଅଛି କି ନାହିଁ ତାହା ନିଶ୍ଚିତ ହୋଇଥାଏ। ଏହା ଏକ ଅତ୍ୟନ୍ତ ସମ୍ବେଦନଶୀଳ ପରୀକ୍ଷା। ଏହାର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ଏହା ବହୁତ କମ୍ ପରିମାଣର ଭାଇରସକୁ ମଧ୍ୟ ଚିହ୍ନଟ କରିପାରିବ। ଏହି ପଦ୍ଧତି ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ଆମ୍ପ୍ଲିଫିକେସନ୍ ଟେଷ୍ଟ (NAAT) ନାମକ ପରୀକ୍ଷା ଗୋଷ୍ଠୀର ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ।

ପିସିଆର ପରୀକ୍ଷା ଦ୍ୱାରା କେଉଁ ରୋଗ ଚିହ୍ନଟ କରାଯାଇପାରିବ?

ଯଦିଓ COVID ମହାମାରୀ ଯୋଗୁଁ PCR ଲୋକପ୍ରିୟ ହୋଇଛି, ଏହା ଦଶନ୍ଧି ଧରି ଚିକିତ୍ସା ଜଗତରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଆସୁଛି। ଏହି ପରୀକ୍ଷା ଦ୍ୱାରା ଅନେକ ଜିନିଷ ଚିହ୍ନଟ କରାଯାଇପାରିବ। ଆସନ୍ତୁ କିଛି ମୁଖ୍ୟ ଜିନିଷ ଉପରେ ନଜର ପକାଇବା।

ପିସିଆର୍ ପରୀକ୍ଷା ପାଇଁ ଆପଣ କିପରି ନମୁନା ନେବେ?

ଆପଣ କେଉଁ ପ୍ରକାରର ରୋଗ ଖୋଜୁଛନ୍ତି ତାହା ଉପରେ PCR ପରୀକ୍ଷା ପାଇଁ ନମୁନା ନେବାର ପଦ୍ଧତି ନିର୍ଭର କରେ। ପ୍ରତ୍ୟେକ ଅବସ୍ଥା ପାଇଁ ନମୁନା ନେବାର ପଦ୍ଧତି ଭିନ୍ନ।

ଅଧିକାଂଶ ସମୟରେ, PCR ପରୀକ୍ଷା ପାଇଁ ପ୍ରସ୍ତୁତ ହେବା ପାଇଁ ଆପଣଙ୍କୁ ବିଶେଷ କିଛି କରିବାକୁ ପଡ଼େ ନାହିଁ। ତଥାପି, କିଛି କ୍ଷେତ୍ରରେ, ଯେପରିକି ବାୟୋପସି ଭଳି କିଛି କରିବା ସମୟରେ, ଆପଣଙ୍କ ଡାକ୍ତର ଆପଣଙ୍କୁ ପୂର୍ବରୁ ଆବଶ୍ୟକୀୟ ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଦେବେ।

ପିସିଆର ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା କିପରି କାମ କରେ?

ଠିକ୍ ଅଛି, ଏବେ ଦେଖିବା ଏହି ଆଶ୍ଚର୍ଯ୍ୟଜନକ ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା ପ୍ରକୃତରେ କିପରି କାମ କରେ। ଏହା ଟିକେ ବୈଜ୍ଞାନିକ, କିନ୍ତୁ ମୁଁ ଏହାକୁ ସରଳ ଭାବରେ ବୁଝାଇବି।

୧. ନମୁନା ପ୍ରସ୍ତୁତି: ପ୍ରଥମେ, ଆପଣଙ୍କଠାରୁ ନିଆଯାଇଥିବା ନମୁନା (ରକ୍ତ, କ୍ଷରଣ, ଇତ୍ୟାଦି)ରୁ DNA କିମ୍ବା RNA ପୃଥକ କରାଯାଏ।

2. ମିଶ୍ରଣ ତିଆରି: ଏହା ପରେ, ଏହି ପୃଥକ DNA/RNA କିଛି ସ୍ୱତନ୍ତ୍ର ରାସାୟନିକ ପଦାର୍ଥ ସହିତ ମିଶ୍ରିତ ହୁଏ। ଏହି ମିଶ୍ରଣରେ ମୁଖ୍ୟ ଜିନିଷ ହେଉଛି DNA ପଲିମେରେଜ୍ ନାମକ ଏକ ଏନଜାଇମ୍। ଏହା ହେଉଛି ମୁଖ୍ୟ ଯାହା ଫଟୋକପି କାର୍ଯ୍ୟ କରେ।

3. ଗରମ ଏବଂ ଶୀତଳୀକରଣ ଚକ୍ର: ଏବେ ଏହି ମିଶ୍ରଣ ସହିତ ଛୋଟ ଟ୍ୟୁବ୍ ଏକ ସ୍ୱତନ୍ତ୍ର ମେସିନ୍ ରେ ରଖାଯାଇଛି। ଏହି ମେସିନ୍ ବହୁତ ଶୀଘ୍ର ତାପମାତ୍ରାକୁ ବୃଦ୍ଧି ଏବଂ ହ୍ରାସ କରେ।

• ବିକୃତୀକରଣ: ପ୍ରଥମେ, ତାପମାତ୍ରା ପ୍ରାୟ 95 ଡିଗ୍ରୀ ସେଲସିୟସ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ବୃଦ୍ଧି ପାଏ। ଏହା ଦୁଇଟି DNA ଷ୍ଟ୍ରେଣ୍ଡକୁ ପୃଥକ କରିଥାଏ।
• ଆନିଲିଂ: ଏହା ପରେ, ତାପମାତ୍ରା ପ୍ରାୟ 55 ଡିଗ୍ରୀକୁ ହ୍ରାସ କରାଯାଏ। ତା'ପରେ, ଆମେ ଖୋଜୁଥିବା DNA ଖଣ୍ଡ ସହିତ ମେଳ ଖାଉଥିବା DNAର ଛୋଟ ଖଣ୍ଡ (ପ୍ରାଇମର) ପୃଥକ DNA ଷ୍ଟ୍ରେଣ୍ଡ ସହିତ ସଂଯୁକ୍ତ ହୁଏ।
• ପୁନଃ ଗରମ (ବିସ୍ତାର): ତା'ପରେ ତାପମାତ୍ରା ପ୍ରାୟ 72 ଡିଗ୍ରୀ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ବୃଦ୍ଧି ପାଏ। ତା'ପରେ DNA ପଲିମରେଜ୍ ଏନଜାଇମ୍ ଆସି ସେହି ପ୍ରାଇମରରୁ ଏକ ନୂତନ DNA ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ ତିଆରି କରେ ଯାହା ମୂଳ DNA ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ ସହିତ ମେଳ ଖାଏ।

୪. ନକଲ କରିବା: ବର୍ତ୍ତମାନ ଗୋଟିଏ DNA ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡର ଦୁଇଟି କପି ତିଆରି କରାଯାଇଛି। ଏହି ତାପମାତ୍ରା ଚକ୍ର ପ୍ରାୟ 30-40 ଥର ପୁନରାବୃତ୍ତି ହୁଏ। ଗୋଟିଏ ଚକ୍ରରେ, DNA ର ପରିମାଣ ଦ୍ୱିଗୁଣିତ ହୁଏ। ଦୁଇ ଚାରି ହୁଏ, ଚାରି ଆଠ ହୁଏ, ଆଠ ଷୋହଳ ହୁଏ... ପ୍ରାୟ 30 ଚକ୍ର ପରେ, DNA ର ମୂଳ ଖଣ୍ଡରୁ ଏକ କୋଟିରୁ ଅଧିକ କପି ତିଆରି ହୋଇଛି।

ବର୍ତ୍ତମାନ, ସେହି DNA/RNA ଖଣ୍ଡ, ଯାହା ପୂର୍ବରୁ ଚିହ୍ନଟ କରିବା ପାଇଁ ବହୁତ ଛୋଟ ଥିଲା, ତାହା ସହଜରେ ଚିହ୍ନଟ କରିବା ପାଇଁ ଯଥେଷ୍ଟ ବଡ଼ ହୋଇଯାଇଛି।

ପିସିଆର ପରୀକ୍ଷାର କିଛି ପ୍ରକାର ଅଛି କି?

ହଁ, ମୁଖ୍ୟତଃ ଦୁଇଟି ପ୍ରକାର ଅଛି ଯାହା ବିଷୟରେ ଆମକୁ ସଚେତନ ରହିବାକୁ ପଡିବ।

• ରିଭର୍ସ-ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପ୍ଟେଜ୍ PCR (RT-PCR): କିଛି ଭାଇରସ, ଯେପରିକି କୋଭିଡ୍, ଇନଫ୍ଲୁଏଞ୍ଜା ଏବଂ HIV, ସେମାନଙ୍କର ଜେନେଟିକ୍ ସୂଚନା DNA ବଦଳରେ RNA ରେ ଥାଏ। ସାଧାରଣ PCR କେବଳ DNA କପି କରିପାରିବ। ତେଣୁ, RT-PCR ରେ ଆପଣ ଯାହା କରନ୍ତି ତାହା ହେଉଛି ପ୍ରଥମେ ଏକ ସ୍ୱତନ୍ତ୍ର ଏନଜାଇମ୍ (`ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପ୍ଟେଜ୍`) ବ୍ୟବହାର କରି ସେହି RNA କୁ DNA ରେ 'ରୂପାନ୍ତରିତ' କରନ୍ତି। ଫଳସ୍ୱରୂପ DNA କୁ ପରିପୂରକ DNA (cDNA) କୁହାଯାଏ। ତା'ପରେ ସାଧାରଣ PCR ପ୍ରକ୍ରିୟା ହୁଏ।

• ରିଅଲ୍-ଟାଇମ୍ PCR / କ୍ୱାଣ୍ଟିଟେଟିଭ୍ PCR (Q-PCR): ଏହା ଏକ ଟିକିଏ ଅଧିକ ଉନ୍ନତ ପଦ୍ଧତି। ଏଥିରେ କ’ଣ ହୁଏ ଯେ DNA କପି ହେବା ସହିତ, ଏଥିରେ ଏକ ଫ୍ଲୋରୋସେଣ୍ଟ ଲେବଲ୍ ସଂଲଗ୍ନ ହୋଇଥାଏ। କପି ହୋଇଥିବା DNA ପରିମାଣ ବଢ଼ିବା ସହିତ, ଏହି ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ମଧ୍ୟ ବୃଦ୍ଧି ପାଏ। ମେସିନ୍ ଏହି ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ମାପିପାରିବ। ତେଣୁ, ଆମେ ଅପେକ୍ଷା କରିବା ସମୟରେ, ଅର୍ଥାତ୍, ରିଅଲ୍-ଟାଇମ୍ ରେ , ଆମେ ଦେଖିପାରିବା ଯେ ନମୁନାରେ ପ୍ରାସଙ୍ଗିକ DNA ଉପସ୍ଥିତ ଅଛି କି ନାହିଁ। କେବଳ ସେତିକି ନୁହେଁ, ଏହା ମୂଳ ନମୁନାରେ (ଭାଇରାଲ୍ ଲୋଡ୍) କେତେ ଭାଇରସ୍ ଥିଲା ତାହାର ଏକ ଆନୁମାନିକ ଧାରଣା ମଧ୍ୟ ଦେଇପାରେ। ଏହି ଉଭୟ ପଦ୍ଧତିକୁ ମିଶ୍ରଣ କରୁଥିବା ଏକ ରିଅଲ୍-ଟାଇମ୍ RT-PCR ପରୀକ୍ଷା ପ୍ରାୟତଃ କୋଭିଡ୍ ଚିହ୍ନଟ କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ।

ପିସିଆର୍ ରିପୋର୍ଟର ଅର୍ଥ କ'ଣ?

ପିସିଆର୍ ରିପୋର୍ଟ ପାଇବା ସମୟରେ ଏହାକୁ ବୁଝିବା ବହୁତ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ।

• ଚିହ୍ନଟ / ସକାରାତ୍ମକ: ଯଦି ଆପଣଙ୍କ ରିପୋର୍ଟ "ଚିହ୍ନିତ" କିମ୍ବା "ସକାରାତ୍ମକ" କୁହେ, ତେବେ ଏହାର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ଯେ ଆପଣଙ୍କ ନମୁନାରେ ସେମାନେ ଖୋଜୁଥିବା ଭାଇରସର କିଛି ଅଂଶ କିମ୍ବା ଜେନେଟିକ୍ ସାମଗ୍ରୀ ଅଛି। ସରଳ ଭାଷାରେ କହିବାକୁ ଗଲେ, ଆପଣଙ୍କ ସଂକ୍ରମଣ ସମ୍ଭବତଃ ଅଛି।

• ଚିହ୍ନଟ ହୋଇନାହିଁ / ନକାରାତ୍ମକ: ଏହାର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ପରୀକ୍ଷିତ ନମୁନାରେ ପ୍ରାସଙ୍ଗିକ DNA/RNA ଖଣ୍ଡ ମିଳିପାରିଲା ନାହିଁ। ଏହାର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ଆପଣଙ୍କର ସେହି ସଂକ୍ରମଣ ନାହିଁ।

ଫଳାଫଳ ପାଇବାକୁ କେତେ ସମୟ ଲାଗେ ତାହା ପରୀକ୍ଷା ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ। ନାସାଲ୍ ସ୍ୱାବ୍ (ଯେପରିକି COVID, ଇନଫ୍ଲୁଏଞ୍ଜା) ସାଧାରଣତଃ 24 ଘଣ୍ଟା ମଧ୍ୟରେ ଫଳାଫଳ ପାଏ। ତଥାପି, ଜେନେଟିକ୍ ରୋଗ ଖୋଜିବା ପାଇଁ ରକ୍ତ ପରୀକ୍ଷା ଏବଂ ବାୟୋପ୍ସି ଗୋଟିଏ ସପ୍ତାହ କିମ୍ବା ଅଧିକ ସମୟ ନେଇପାରେ।

ଯଦି ଆପଣଙ୍କର PCR ପରୀକ୍ଷା କିମ୍ବା ଏହାର ଫଳାଫଳ ବିଷୟରେ କୌଣସି ପ୍ରଶ୍ନ କିମ୍ବା ଚିନ୍ତା ଅଛି, ତେବେ ଏହା ବିଷୟରେ ଆପଣଙ୍କ ଡାକ୍ତରଙ୍କ ସହ କଥା ହେବା ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ।