PCR परीक्षण भनेको के हो? यसको बारेमा सरल भाषामा कुरा गरौं!

जब हामी PCR शब्द सुन्छौं, हामी कोभिड महामारीको बारेमा सोच्दछौं, हैन त? त्यो समय जब हामीले आफ्नो नाकमा स्वाब राख्नुपर्थ्यो र रिपोर्ट आउन पर्खनुपर्थ्यो... त्यो कहिल्यै बिर्सने छैन। तर के तपाईंलाई थाहा छ कि PCR केवल कोभिड पत्ता लगाउन मात्र प्रयोग गरिँदैन? यो वास्तवमा एक धेरै महत्त्वपूर्ण परीक्षण हो जसले चिकित्सा विज्ञानमा ठूलो सफलता हासिल गरेको छ। त्यसैले आज, यो PCR परीक्षण के हो, यसले अरू के-के कुराहरू पत्ता लगाउन सक्छ, र यो कसरी काम गर्छ भन्ने बारेमा कुरा गरौं जुन तपाईंले बुझ्न सक्नुहुन्छ।

PCR भनेको के हो?

ठिक छ, यसलाई यसरी राखौं। कल्पना गर्नुहोस्, तपाईंले एउटा ठूलो पुस्तकालयमा रहेका हजारौं पुस्तकहरूमध्ये एउटा पुस्तकको एउटै पृष्ठमा एउटा शब्द पनि फेला पार्नुपर्‍यो। त्यो कति गाह्रो हुनेछ? यो हाम्रो शरीरका कोषहरू भित्र रहेको आनुवंशिक सामग्री, DNA वा RNA को सानो टुक्रा फेला पार्नु जस्तै हो।

PCR (पोलिमेरेज चेन रियाक्सन) प्रविधिले त्यो कठिन कामलाई सजिलो बनाउँछ। यसले के गर्छ भने हामीले खोजिरहेका DNA वा RNA को सबैभन्दा सानो टुक्रालाई लाखौं, लाखौं पटक पनि प्रतिलिपि बनाउँछ (एम्प्लीफिकेशन)। यो पुस्तकालयको पुस्तकमा शब्द भएको पृष्ठ फेला पार्नु, फोटोकपी मेसिनमा राख्नु र लगभग दस लाख प्रतिलिपि बनाउनु जस्तै हो। त्यसपछि, त्यो गाह्रो शब्द अब जताततै भएकोले, हामी यसलाई सजिलै पहिचान गर्न सक्छौं।

सरल भाषामा भन्नु पर्दा, PCR एउटा परीक्षण हो जसले हाम्रो शरीरबाट धेरै थोरै मात्रामा कोष, रगतको थोपा, वा नाकको स्वाब लिन्छ र हाम्रो नमूनामा उपस्थित छ वा छैन भनेर पुष्टि गर्न प्रयोगशालामा DNA वा RNA को एक विशिष्ट टुक्रा कृत्रिम रूपमा बढाउँछ। यो एक धेरै संवेदनशील परीक्षण हो। यसको मतलब यो भाइरसको धेरै सानो मात्रा पनि पत्ता लगाउन सक्छ। यो विधि न्यूक्लिक एसिड एम्प्लीफिकेशन टेस्ट (NAAT) भनिने परीक्षणहरूको समूहसँग सम्बन्धित छ।

PCR परीक्षणबाट कस्ता रोगहरू पत्ता लगाउन सकिन्छ?

कोभिड महामारीका कारण पीसीआर लोकप्रिय भए पनि, चिकित्सा जगतमा दशकौंदेखि यसको प्रयोग हुँदै आएको छ। यस परीक्षणबाट धेरै कुराहरू पत्ता लगाउन सकिन्छ। केही मुख्य कुराहरू हेरौं।

PCR परीक्षणको लागि नमुना कसरी लिने?

PCR परीक्षणको लागि तपाईंले नमुना लिने तरिका तपाईंले कस्तो प्रकारको रोग खोज्दै हुनुहुन्छ भन्ने कुरामा निर्भर गर्दछ। प्रत्येक अवस्थाको लागि नमुना लिने तरिका फरक हुन्छ।

धेरैजसो समय, PCR परीक्षणको तयारी गर्न तपाईंले विशेष केही गर्नुपर्दैन। यद्यपि, केही अवस्थामा, जस्तै बायोप्सी गर्दा, तपाईंको डाक्टरले तपाईंलाई पहिले नै आवश्यक निर्देशनहरू दिनेछन्।

PCR प्रविधिले कसरी काम गर्छ?

ठिक छ, अब हेरौं यो अद्भुत प्रविधिले वास्तवमा कसरी काम गर्छ। यो अलि वैज्ञानिक छ, तर म यसलाई सरल तरिकाले व्याख्या गर्नेछु।

१. नमुना तयारी: पहिले, तपाईंबाट लिइएको नमुना (रगत, स्राव, आदि) बाट DNA वा RNA अलग गरिन्छ।

२. मिश्रण बनाउने: त्यसपछि, यो पृथक गरिएको DNA/RNA लाई केही विशेष रसायनहरूसँग मिसाइन्छ। यस मिश्रणमा मुख्य कुरा DNA पोलिमरेज भनिने इन्जाइम हो। यो मुख्य हो जसले फोटोकपी गर्ने काम गर्छ।

३. ताप र शीतलन चक्र: अब यो मिश्रण भएको सानो ट्यूबलाई विशेष मेसिनमा राखिन्छ। यो मेसिनले तापक्रम धेरै छिटो बढाउँछ र घटाउँछ।

• विकृतीकरण: पहिलो, तापक्रम लगभग ९५ डिग्री सेल्सियससम्म बढाइन्छ। यसले दुई डीएनए स्ट्र्यान्डहरू अलग गर्छ।
• एनिलिङ: त्यसपछि, तापक्रम लगभग ५५ डिग्रीमा घटाइन्छ। त्यसपछि, हामीले खोजिरहेको DNA खण्डसँग मेल खाने DNA (प्राइमर) का साना टुक्राहरू छुट्याइएको DNA स्ट्र्यान्डहरूमा जोडिन्छन्।
• पुन: तताउने (विस्तार): त्यसपछि तापक्रम लगभग ७२ डिग्रीमा बढाइन्छ। त्यसपछि DNA पोलिमरेज इन्जाइम आउँछ र त्यो प्राइमरबाट नयाँ DNA स्ट्र्यान्ड बनाउँछ जुन मूल DNA स्ट्र्यान्डसँग मेल खान्छ।

४. प्रतिलिपि बनाउने: अब एउटा डीएनए स्ट्र्यान्डको दुई प्रतिलिपि बनाइएको छ। यो तापक्रम चक्र लगभग ३०-४० पटक दोहोरिन्छ। एउटा चक्रमा, डीएनएको मात्रा दोब्बर हुन्छ। दुई चार हुन्छ, चार आठ हुन्छ, आठ सोह्र हुन्छ... लगभग ३० चक्र पछि, डीएनएको मूल एकल टुक्राबाट एक अर्ब भन्दा बढी प्रतिलिपिहरू बनाइएको छ।

अब, त्यो DNA/RNA टुक्रा, जुन पहिले पत्ता लगाउन धेरै सानो थियो, सजिलै पत्ता लगाउन पर्याप्त ठूलो भएको छ।

के त्यहाँ PCR परीक्षणका प्रकारहरू छन्?

हो, हामीले सचेत हुनुपर्ने मुख्यतया दुई प्रकार छन्।

• रिभर्स-ट्रान्सक्रिप्टेज पीसीआर (RT-PCR): कोभिड, इन्फ्लुएन्जा र एचआईभी जस्ता केही भाइरसहरूको आनुवंशिक जानकारी डीएनएमा नभई आरएनएमा हुन्छ। सामान्य पीसीआरले डीएनए मात्र प्रतिलिपि गर्न सक्छ। त्यसैले, आरटी-पीसीआरमा तपाईंले गर्ने काम भनेको पहिले त्यो आरएनएलाई डीएनएमा 'रूपान्तरण' गर्न विशेष इन्जाइम ('रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज') प्रयोग गर्नु हो। परिणामस्वरूप प्राप्त हुने डीएनएलाई पूरक डीएनए (cDNA) भनिन्छ। त्यसपछि सामान्य पीसीआर प्रक्रिया हुन्छ।

• वास्तविक-समय PCR / मात्रात्मक PCR (Q-PCR): यो अलि बढी उन्नत विधि हो। यसमा के हुन्छ भने DNA प्रतिलिपि गरिँदा, यसमा फ्लोरोसेन्ट लेबल जोडिन्छ। प्रतिलिपि गरिएको DNA को मात्रा बढ्दै जाँदा, यो प्रतिलिपि पनि बढ्छ। मेसिनले यो प्रतिलिपि मापन गर्न सक्छ। त्यसैले, हामी पर्खिरहेको बेला, अर्थात्, वास्तविक समयमा , हामी नमूनामा सान्दर्भिक DNA उपस्थित छ कि छैन भनेर हेर्न सक्छौं। त्यति मात्र होइन, यसले मूल नमूना (भाइरल लोड) मा कति भाइरस थियो भन्ने कुराको मोटामोटी विचार पनि दिन सक्छ। यी दुवै विधिहरूलाई संयोजन गर्ने वास्तविक-समय RT-PCR परीक्षण प्रायः कोभिड पत्ता लगाउन प्रयोग गरिन्छ।

PCR रिपोर्टको अर्थ के हो?

PCR रिपोर्ट प्राप्त गर्दा यसलाई बुझ्नु धेरै महत्त्वपूर्ण छ।

• पत्ता लागेको / पोजेटिभ: यदि तपाईंको रिपोर्टले "पत्ता लागेको" वा "पोजेटिभ" भन्छ भने, यसको अर्थ तपाईंको नमुनामा उनीहरूले खोजिरहेको भाइरस वा आनुवंशिक सामग्रीका केही भागहरू थिए। सरल भाषामा भन्नुपर्दा, तपाईंलाई सम्भवतः संक्रमण भएको हुन सक्छ।

• पत्ता लागेन / नकारात्मक: यसको अर्थ परीक्षण गरिएको नमूनामा सम्बन्धित DNA/RNA टुक्राहरू फेला परेनन्। यसको अर्थ तपाईंलाई त्यो संक्रमण नभएको सम्भावना बढी हुन्छ।

नतिजा आउन कति समय लाग्छ भन्ने कुरा परीक्षण गरिँदै गरेको अवस्थामा निर्भर गर्दछ। नाकको स्वाब (जस्तै कोभिड, इन्फ्लुएन्जा) ले सामान्यतया २४ घण्टा भित्र नतिजा दिन्छ। यद्यपि, आनुवंशिक रोगहरू हेर्न रगत परीक्षण र बायोप्सी गर्न एक हप्ता वा बढी समय लाग्न सक्छ।

यदि तपाईंसँग PCR परीक्षण वा यसको नतिजाको बारेमा कुनै प्रश्न वा चिन्ता छ भने, यस बारेमा आफ्नो डाक्टरसँग कुरा गर्न निश्चित हुनुहोस्।