Шта је ПЦР тест? Хајде да причамо о томе једноставно!

Када чујемо реч ПЦР, помислимо на пандемију Ковида, зар не? Време када смо морали да ставимо брис у нос и чекамо извештај... то никада неће бити заборављено. Али да ли сте знали да се ПЦР не користи само за откривање Ковида? Ово је заправо веома важан тест који је направио огроман пробој у медицинској науци. Зато данас, хајде да разговарамо о томе шта је овај ПЦР тест, шта још може да открије и како функционише на једноставан начин који можете разумети.

Шта је једноставно ПЦР?

У реду, рецимо то овако. Замислите да морате да пронађете једну реч на једној страници једне књиге, од хиљада књига у великој библиотеци. Колико би то било тешко? То је као да пронађете сићушни део ДНК или РНК , генетског материјала унутар ћелија у нашим телима.

ПЦР (полимеразне ланчане реакције) технологија олакшава тај тежак задатак. Она копира најмањи део ДНК или РНК који тражимо стотине хиљада, чак и милионе пута (амплификација). То је као да пронађете страницу са речју у библиотечкој књизи, ставите је у фотокопир апарат и направите око милион копија. Затим, пошто је та тешко доступна реч сада свуда, можемо је лако идентификовати.

Једноставно речено, ПЦР је тест који узима веома малу количину ћелије из нашег тела, кап крви или брис из носа, и вештачки узгаја одређени део ДНК или РНК у њој у лабораторији како би се потврдило да ли је присутан у нашем узорку или не. Ово је веома осетљив тест. То значи да може да детектује чак и веома мале количине вируса. Ова метода припада групи тестова који се називају тест амплификације нуклеинских киселина (NAAT).

Које болести се могу открити ПЦР тестом?

Иако је ПЦР постао популаран због пандемије COVID-19, у медицинском свету се користи већ деценијама. Много је ствари које се могу открити овим тестом. Хајде да погледамо неке од главних.

Како се узима узорак за ПЦР тест?

Начин узимања узорка за ПЦР тест зависи од врсте болести коју тражите. Метода узимања узорка је различита за свако стање.

У већини случајева, не морате да радите ништа посебно да бисте се припремили за ПЦР тест. Међутим, у неким случајевима, као што је биопсија, ваш лекар ће вам унапред дати потребна упутства.

Како функционише ПЦР технологија?

У реду, сада да видимо како ова невероватна технологија заправо функционише. Ово је мало научно, али објаснићу једноставно.

1. Припрема узорка: Прво, ДНК или РНК се изолује из узорка (крви, секрета итд.) узетог од вас.

2. Прављење смеше: Затим се ова изолована ДНК/РНК меша са неким посебним хемикалијама. Главна ствар у овој смеши је ензим који се зове ДНК полимераза . То је главни ензим који обавља посао фотокопирања.

3. Циклус загревања и хлађења: Сада се мала епрувета са овом смешом ставља у посебну машину. Ова машина веома брзо подиже и спушта температуру.

• Денатурација: Прво, температура се повећава на око 95 степени Целзијуса. Ово доводи до раздвајања два ланца ДНК.
• Жарење: Затим се температура снижава на око 13 степени Целзијуса. Затим се мали делови ДНК (прајмери) који одговарају фрагменту ДНК који тражимо причвршћују на одвојене ланце ДНК.
• Поновно загревање (екстензија): Затим се температура подиже на око 22 степена Целзијуса. Затим улази ензим ДНК полимераза и ствара нови ланац ДНК од тог прајмера који се поклапа са оригиналним ланцем ДНК.

4. Копирање: Сада су направљене две копије једног ланца ДНК. Овај температурни циклус се понавља око 30-40 пута. У једном циклусу, количина ДНК се удвостручује. Две постају четири, четири постају осам, осам постаје шеснаест... Након око 30 циклуса, више од милијарду копија је направљено од оригиналног једног дела ДНК.

Сада је тај фрагмент ДНК/РНК, који је раније био премали за детекцију, постао довољно велики да се лако детектује.

Да ли постоје врсте ПЦР тестова?

Да, постоје углавном две врсте којих морамо бити свесни.

• ПЦР са реверзном транскриптазом (РТ-ПЦР): Неки вируси, као што су Ковид, грип и ХИВ, имају своје генетске информације у РНК, а не у ДНК. Нормална ПЦР може да копира само ДНК. Дакле, оно што радите у РТ-ПЦР јесте да прво користите посебан ензим („реверзна транскриптаза“) да бисте „претворили“ ту РНК у ДНК. Добијена ДНК се назива комплементарна ДНК (цДНК). Затим се одвија нормалан процес ПЦР.

• ПЦР у реалном времену / квантитативна ПЦР (Q-PCR): Ово је мало напреднија метода. Оно што се дешава код ње јесте да се, како се ДНК копира, на њу причвршћује флуоресцентна ознака. Како се количина копиране ДНК повећава, повећава се и ова флуоресценција. Машина може да мери ову флуоресценцију. Дакле, док чекамо, односно у реалном времену , можемо видети да ли је релевантна ДНК присутна у узорку или не. Не само то, већ може дати и приближну представу о томе колико је вируса било у оригиналном узорку (вирусно оптерећење). RT-PCR тест у реалном времену који комбинује обе ове методе често се користи за откривање Ковида.

Шта значи ПЦР извештај?

Веома је важно да разумете ПЦР извештај када га примите.

• Откривено / Позитивно: Ако у вашем извештају пише „Откривено“ или „Позитивно“, то значи да је ваш узорак садржао делове вируса или генетског материјала који су тражили. Једноставно речено, вероватно имате инфекцију.

• Није детектовано / Негативно: Ово значи да релевантни фрагменти ДНК/РНК нису могли бити пронађени у тестираном узорку. То значи да највероватније немате ту инфекцију.

Колико је времена потребно да се добију резултати варира у зависности од теста који се ради. Брисеви носа (као што су COVID, грип) обично дају резултате у року од 24 сата. Међутим, анализе крви и биопсије за тражење генетских болести могу потрајати недељу дана или дуже.

Ако имате било каквих питања или недоумица у вези са ПЦР тестом или његовим резултатима, обавезно разговарајте са својим лекаром о томе.