Калі мы чуем слова ПЦР, мы ўспамінаем пандэмію Covid, праўда? Час, калі нам даводзілася ўстаўляць мазок у нос і чакаць вынікаў... гэта ніколі не забудзецца. Але ці ведалі вы, што ПЦР выкарыстоўваецца не толькі для выяўлення Covid? Гэта насамрэч вельмі важны тэст, які зрабіў велізарны прарыў у медыцынскай навуцы. Таму сёння давайце пагаворым пра тое, што такое гэты ПЦР-тэст, што яшчэ ён можа выявіць і як ён працуе, простым і зразумелым спосабам.
Што такое ПЦР проста?
Добра, давайце скажам так. Уявіце, што вам трэба знайсці адно слова на адной старонцы адной кнігі сярод тысяч кніг у вялікай бібліятэцы. Наколькі складана гэта было б? Гэта як знайсці малюсенькі кавалачак ДНК або РНК , генетычнага матэрыялу ўнутры клетак нашага цела.
Тэхналогія ПЦР (палімеразная ланцуговая рэакцыя) спрашчае гэтую складаную задачу. Яна дазваляе капіяваць самы маленькі фрагмент ДНК або РНК, які мы шукаем, сотні тысяч, нават мільёны разоў (ампліфікацыя). Гэта як знайсці старонку са словам у бібліятэчнай кнізе, пакласці яе ў ксеракс і зрабіць каля мільёна копій. Затым, паколькі гэтае цяжкадаступнае слова цяпер паўсюль, мы можам лёгка яго ідэнтыфікаваць.
Проста кажучы, ПЛР — гэта тэст, пры якім з нашага цела бярэцца вельмі невялікая колькасць клеткі, кропля крыві або мазок з носа, і ў лабараторыі штучна вырошчваецца пэўны фрагмент ДНК або РНК, каб пацвердзіць, ці прысутнічае ён у нашым узоры. Гэта вельмі адчувальны тэст. Гэта азначае, што ён можа выявіць нават вельмі невялікую колькасць віруса. Гэты метад належыць да групы тэстаў пад назвай тэст ампліфікацыі нуклеінавых кіслот (NAAT).
Якія захворванні можна выявіць з дапамогай ПЛР-тэсту?
Нягледзячы на тое, што ПЛР стала папулярнай з-за пандэміі COVID, яна выкарыстоўваецца ў медыцыне ўжо некалькі дзесяцігоддзяў. З дапамогай гэтага тэсту можна выявіць шмат чаго. Давайце разгледзім некаторыя з асноўных з іх.
| Што можна вызначыць | Прыклады і тлумачэнні |
|---|---|
| Інфекцыйныя захворванні | Ён можа выяўляць захворванні, выкліканыя мікраарганізмамі, такімі як вірусы, бактэрыі, грыбы і паразіты. Напрыклад, ПЛР выкарыстоўваецца для дакладнага выяўлення такіх захворванняў, як COVID-19, ліхаманка денге, грып, туберкулёз, ВІЧ, а таксама гепатыт B і C. |
| Генетычныя захворванні | Некаторыя захворванні перадаюцца па спадчыне праз гены. ПЛР дапамагае выявіць пэўныя змены (мутацыі) у гэтых генах. Прыклады: мукавісцыдоз, хвароба Хантынгтана. |
| Рак | Гэты тэст можа вызначыць спецыфічныя генетычныя змены ў ракавых клетках. Гэта можа дапамагчы лекарам выбраць лекі, якія могуць быць накіраваны на гэты від раку (таргетная тэрапія). |
| Прэнатальнае тэставанне | Тэхналогія ПЛР выкарыстоўваецца ў тэстах, каб загадзя вызначыць, ці ёсць у дзіцяці ва ўлонні маці якія-небудзь генетычныя захворванні. |
| Судовая навука | ДНК здабываецца з вельмі маленькай плямы крыві або валасінкі, знойдзенай на месцы злачынства, ампліфікуецца з дапамогай тэхналогіі ПЛР і выкарыстоўваецца для ідэнтыфікацыі падазраваных. |
Як узяць пробу для ПЛР-тэсту?
Спосаб здачы пробы для ПЛР-тэсту залежыць ад тыпу захворвання, якое вы шукаеце. Метад здачы пробы адрозніваецца для кожнага захворвання.
| Метад выбаркі | У якой сітуацыі гэта робіцца? |
|---|---|
| Узор крыві (аналіз крыві) | Для выяўлення генетычных захворванняў, а таксама некаторых вірусаў (напрыклад, ВІЧ, гепатыту В/С), якія трапілі ў кроў, бярэцца аналіз крыві. |
| Мазок з насаглоткі | Гэта метад, які мы ўсе ведаем. Памятаеце, як вы засунулі палку ў нос падчас Covid? Гэты метад выкарыстоўваецца для выяўлення вірусаў, якія дзівяць дыхальную сістэму (COVID, грып, РСВ). |
| Біяпсія | Гэты ўзор бярэцца з невялікага кавалачка тканіны ракавай пухліны або касцявога мозгу і выкарыстоўваецца для пошуку генетычных змен у клетках. |
| Амніяцэнтэз | Гэта робіцца для праверкі генетычнага стану дзіцяці шляхам забору невялікай колькасці амніятычнай вадкасці, якая акружае дзіця, у цяжарнай маці. |
| Перадымплантацыйная генетычная дыягностыка | Пры экстракарпаральным апладненні (ЭКА) гэты метад выкарыстоўваецца для праверкі некалькіх клетак эмбрыёна на наяўнасць генетычных захворванняў перад імплантацыяй у матку маці. |
У большасці выпадкаў вам не трэба рабіць нічога асаблівага для падрыхтоўкі да ПЛР-тэсту. Аднак у некаторых выпадках, напрыклад, пры правядзенні біяпсіі, ваш лекар загадзя дасць вам неабходныя інструкцыі.
Як працуе тэхналогія ПЛР?
Добра, цяпер давайце паглядзім, як насамрэч працуе гэтая дзіўная тэхналогія. Гэта крыху навукова, але я растлумачу гэта проста.
1. Падрыхтоўка ўзору: спачатку з узятага ў вас узору (крыві, сакрэтаў і г.д.) вылучаецца ДНК або РНК.
2. Прыгатаванне сумесі: Далей гэтая ізаляваная ДНК/РНК змешваецца з некаторымі адмысловымі хімічнымі рэчывамі. Галоўным кампанентам гэтай сумесі з'яўляецца фермент пад назвай ДНК-палімераза . Гэта асноўны фермент, які выконвае працэс фотакапіравання.
3. Цыкл награвання і астуджэння: Цяпер невялікая прабірка з гэтай сумессю змяшчаецца ў спецыяльную машыну. Гэтая машына вельмі хутка павышае і паніжае тэмпературу.
- Дэнатурацыя: спачатку тэмпературу павышаюць прыкладна да 95 градусаў Цэльсія. Гэта прыводзіць да падзелу двух нітак ДНК.
- Адпал: Далей тэмпературу зніжаюць прыкладна да 55 градусаў. Затым да падзеленых нітак ДНК прымацоўваюць невялікія кавалачкі ДНК (праймеры), якія адпавядаюць патрэбнаму фрагменту ДНК.
- Паўторны нагрэў (падаўжэнне): Затым тэмпературу павышаюць прыкладна да 72 градусаў. Затым у дзеянне ўступае фермент ДНК-палімераза і стварае новы ланцуг ДНК з гэтага праймера, які адпавядае зыходнаму ланцугу ДНК.
4. Капіраванне: Цяпер створаны дзве копіі аднаго ланцуга ДНК. Гэты тэмпературны цыкл паўтараецца каля 30-40 разоў. За адзін цыкл колькасць ДНК падвойваецца. Дзве становяцца чатырма, чатыры становяцца васьмю, восем становяцца шаснаццаццю... Прыкладна праз 30 цыклаў з першапачатковага адзінага кавалка ДНК ствараецца больш за мільярд копій.
Цяпер гэты фрагмент ДНК/РНК, які раней быў занадта малы для выяўлення, стаў дастаткова вялікім, каб яго можна было лёгка выявіць.
Ці існуюць віды ПЛР-тэстаў?
Так, ёсць два асноўныя тыпы, пра якія нам трэба ведаць.
- ПЦР з адваротнай транскрыптазай (ПЦР-ЗТ): Некаторыя вірусы, такія як Covid, грып і ВІЧ, маюць сваю генетычную інфармацыю ў РНК, а не ў ДНК. Звычайная ПЦР можа капіяваць толькі ДНК. Такім чынам, у ПЦР-ЗТ спачатку выкарыстоўваецца спецыяльны фермент («зваротная транскрыптаза») для «пераўтварэння» гэтай РНК у ДНК. Атрыманая ДНК называецца камплементарнай ДНК (кДНК). Затым адбываецца звычайны працэс ПЦР.
- ПЦР у рэжыме рэальнага часу / колькасная ПЦР (Q-PCR): гэта крыху больш складаны метад. Пры гэтым па меры капіявання ДНК да яе далучаецца флуарэсцэнтная метка. Па меры павелічэння колькасці капіяванай ДНК гэтая флуарэсцэнцыя таксама павялічваецца. Прылада можа вымяраць гэтую флуарэсцэнцыю. Такім чынам, пакуль мы чакаем, гэта значыць у рэжыме рэальнага часу , мы можам бачыць, ці прысутнічае адпаведная ДНК ва ўзоры. Акрамя таго, гэта таксама можа даць прыблізнае ўяўленне аб тым, колькі віруса было ў зыходным узоры (вірусная нагрузка). Тэст ПЦР у рэжыме рэальнага часу , які спалучае абодва гэтыя метады, часта выкарыстоўваецца для выяўлення Covid.
Што азначае ПЦР-справаздача?
Вельмі важна разумець ПЛР-справаздачу, калі вы яе атрымліваеце.
- Выяўлена / Станоўчы: Калі ў вашай справаздачы пазначана «Выяўлена» або «Станоўчы», гэта азначае, што ваш узор утрымліваў часткі віруса або генетычнага матэрыялу, які шукалі. Проста кажучы, у вас, верагодна, ёсць інфекцыя.
- Не выяўлена / Адмоўны: Гэта азначае, што адпаведныя фрагменты ДНК/РНК не былі знойдзены ў правераным узоры. Гэта азначае, што, хутчэй за ўсё, у вас няма гэтай інфекцыі.
Але вось нешта вельмі важнае. Часам, калі вы робіце тэст на ранніх стадыях інфекцыі (асабліва да пачатку сімптомаў), колькасць віруса ў вашым арганізме можа быць нізкай, і ПЛР можа яго не выявіць. Такім чынам, нават калі вы атрымаеце вынік «Не выяўлена», калі ў вас усё яшчэ ёсць сімптомы, лепш звярнуцца да лекара і прытрымлівацца яго рэкамендацый. Вам могуць прапанаваць паўтарыць тэст праз некалькі дзён.
Колькі часу патрабуецца для атрымання вынікаў, залежыць ад праведзенага тэсту. Мазкі з носа (напрыклад, пры COVID, грыпе) звычайна даюць вынікі на працягу 24 гадзін. Аднак аналізы крыві і біяпсія для выяўлення генетычных захворванняў могуць заняць тыдзень ці больш.
Калі ў вас ёсць якія-небудзь пытанні ці асцярогі адносна ПЛР-тэсту або яго вынікаў, абавязкова пагаворыце пра гэта са сваім лекарам.
Паведамленне на вынас
- ПЛР — гэта не проста тэст на COVID. Гэта вельмі магутны і дакладны медыцынскі тэст, які выкарыстоўваецца для дыягностыкі розных інфекцый, генетычных захворванняў і такіх станаў, як рак.
- Гэтая тэхналогія капіюе вельмі невялікую колькасць ДНК або РНК ва ўзоры ў мільёны копій, даводзячы яе да лёгка выяўляльнага ўзроўню.
- Нават калі вынік ПЛР «Не выяўлена» (адмоўны), наяўнасць сімптомаў не азначае на 100% адсутнасць хваробы. Такое можа быць, асабліва на ранніх стадыях інфекцыі.
- Ваш лекар — найлепшы чалавек, які адкажа на любыя вашы пытанні ці праблемы адносна вынікаў аналізаў і стану здароўя, таму ніколі не саромейцеся звяртацца да яго.
💬 Comments (0)
Пакуль няма каментарыяў. Дадайце свой каментарый тут у першы раз.
Дадаць каментар